医学实验动物学第七章动物实验设计和实施.ppt

Page ? * 动物实验的设计和实施 实验动物科学部 邢凤英 2015-10 动物实验设计的意义 一、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表高水平的学术论文非常重要 二、目前许多动物实验质量不高 1、动物质量不高,低级别动物给实验结果的科学性带来影响。 2、实验设计和统计学分析能力有限 三、一个好的实验设计，对统计学分析来说帮助很大，可以使问题变得更加容易解决 四、一个不正确的实验设计，导致结果信息无用。 动物实验设计概论 动物实验设计概论 动物实验的分类 1、确证性的实验：用一种最大可能,正确解答问题的系统方法，收集有关处理实施后动物反应的科学数据。 2、探索性的实验：为产生新的假说提供素材。 这两类实验都涉及在实验人员的控制下，对动物施加一定的处理或操作，来发现是否处理在实验对象上引起一定的反应，或者对这种反应进行定量。 3、检验性实验：是观察性的实验，用于发现科研人员不能控制的变量之间的联系。这种联系可能是暂时的也可能是长期的。 3R原则 一、减少 NO.1 Reduction 二、替代 NO.2 Replacement 三、优化 NO.3 Refinement 动物实验设计概论 差异的控制 一、概述 有机体的形态行为特征要适应环境，正是这种适应的不同导致有机体产生个体之间的差异，因而，动物的适应性的倾向对一个精确的实验设计来说是不可回避的挑战。 生物学的观察是在一个可变背景上进行的 1、生命形成的化学过程复杂 2、生命适应环境不停的变化，稳定性差（差异大，所用数量多） 差异的来源 1、实验者 2、动物固有 3、动物所处环境相互作用产生的差异 差异的控制 二、实验者带来的差异 1、实验过程的实施 实验操作的一致性、准确性、完整性： A: 每只动物更换注射器 B: 注射器容量，精确 C: 根据称重给药（吸入药品后注射器重量-空注射器重量=剂量） D: 良好的操作技术（避免给药时，药物溢漏） 实验操作的小心，减少动物紧张情绪： A: 代谢 B: 血流（影响血流速度，从而影响药物的吸收率） 差异的控制 二、实验者带来的差异 2、不准确的测量 A：尽管现在的测量手段越来越先进，但是有些方法本身就存在缺陷。 例如：凝胶电泳（点和带的迁移率、密度、大小受很多微妙因素影响）；光密度扫描（色彩的饱和度可以使结果呈现非线性） B: 观察动物自然行为的测量，控制更困难。 例如：采用多个不同观察人员，数据交换分析数据。 一个连续的时间点，重复观测。 差异的控制 二、实验者带来的差异 2、不准确的测量 C: 动机状态观察 专业观察人员，采用同一标准。行为类型被分解成更加数量化的组分。 动物不同行为分解为元素，采用同一打分系统。 D: 整体动物进行实验时，行为学和生态学观测的差异是可以控制的 GLP( good laboratory practice)，最根本的基础是实验中得到的数据和信息的可信性是通过人员的工作质量来保证和实现的。实验观察的每一个步骤，必须按照SOP（standard operating procedure)的文本执行。 差异的控制 三、固有动物之间的差异 动物之间除了遗传组成的差异外，许多其他方面的影响也能增加动物间的差异，是我们进行试验设计时需要加以重视和考虑的差异来源。 1、动物来源不同 2、动物饲养管理的差别 3、动物生活环境的不同： 4、动物健康状况 温度：排气口的温度高3~4度 湿度：排气口湿度高5%~10% 光线：不同层面，感受光线不同 声音：20~40HZ,交配推迟，产仔低 垫料：松木和桉木可以引起大动物肝脏酶活性和细胞毒效应的物质。 差异的控制 四、动物与环境之间相互作用引起的差异 1、动物对环境应激或应激的生理反应、行为反应和生化反应 使用环境丰富物，增加生存环境的复杂性，减少应激。 2、群居 群居体重差异小，等级明显，丰富物（改善还是恶化） 差异的控制 四、动物与环境之间相互作用引起的差异 3、动物与实验操作过程之间相互作用诱发产生的差异是存在的 动物对不同饲养者表现不同，人员保持一致 实验时间和饲养程序的之间的关系：更换笼盒前后给药不同效果，给药顺序不同，同样引起差异 动物发出信号 控制这类差异最有效的方法： A: 确保操作人员的熟练程度 B: 开始实验前动物适应过程 C: 给动物奖励 动物实验设计的