多环芳烃羟基代谢产物检测新方法及其应用研究-卫生毒理学专业论文.docxVIP

南华大学硕士学位论文多环 南华大学硕士学位论文 多环芳烃羟基代谢产物检测新方法及其应用研究 PAGE PAGE VI 主要缩写符号与对照 缩写符号 BG 英文名称 Brilliant Green 中文名称 灿烂绿 β-CD SFS β-Cyclodextrin Synchronous Fluorescence Spectroscopy β-环糊精 同步荧光法 HPLC High Performance Liquid Chromatography 高效液相色谱 α-Nap β-Nap 1-OHP PAHs α-Naphthol β-Naphthol 1-Hydroxypyrene Polycyclic Aromatic Hydrocarbons α-萘酚 β-萘酚 1-羟基芘 多环芳烃 RSD Relative Standard Deviation 相对标准差 RLS Resonance Light Scattering 共振光散射 RPC Reversed Phase Chromatography 反相色谱 SDBS Sodium Dodecylbenzene Sulfonate 十二烷基苯磺酸钠 Tris HydroxymethyI Aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 多环芳烃羟基代谢产物检测新方法及其应用研究 研究生： 王 英 导 师： 王永生 专 业： 卫生毒理学 摘 要 多环芳烃（Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs）是环境中普遍存在的 一类有机污染物，在职业高 PAHs 暴露环境下，易诱发肺癌、皮肤癌等癌症。由 于暴露途径多样化，采用 PAHs 羟基代谢产物（主要有 1-羟基芘、α-萘酚、β-萘 酚）作为生物标志物来综合评价人体对 PAHs 的暴露水平已成为人们研究的热点。 因而研究 1-羟基芘、α-萘酚、β-萘酚的检测新方法有着重要的现实意义。 本文第二章应用同步荧光法建立了同时检测尿样中α-萘酚、β-萘酚和1-羟基 芘(1-OHP)的新方法。在乙酸钠-硼砂缓冲液（pH=5.0），以β-环糊精为增敏剂， 当激发单色器和发射单色器的波长差 ???=23nm时，进行同步扫描，可得β-萘酚 同步荧光特征峰为330.6nm，1-OHP为360.2nm；改 ???为175nm，可得α-萘酚的特 征荧光峰为296.4nm。三种待测物均可根据其特征峰的高度来进行定量测定。 1-OHP 的 测 定 范 围 为 0.65-218.3μg/L ， α- 萘 酚 为 3.6-1586.0μg/L ， β- 萘 酚 为 2.8-1441.0μg/L。1-OHP、α-萘酚和β-萘酚的检出限分别为0.022μg/L、1.53μg/L、 和0.78μg/L，相对标准差分别1.6%-1.8%、1.5%-2.3%和1.9%-2.4%（n=9）。方法 灵敏、可靠，已用于实际样品的测定，结果满意。 本文第三章应用反相高效液相色谱-紫外检测器法建立了同时检测 α-萘酚、 β-萘酚和 1-羟基芘的新方法。采用 DiamonsilTMC18（5μm，150×4.6nm）色谱柱， 以甲醇-乙酸铵缓冲溶液（70:30，v:v）为流动相，在波长 280nm 检测，流速为 0.7mL/min 。结果表明，当 α- 萘酚、 β- 萘酚和 1-OHP 的 质 量 浓 度 分 别 为 0.3600-18.72μg/mL，0.3600-18.72μg/mL，0.2700-11.88μg/mL 时，峰高和质量浓 度呈良好的线性关系，相对标准偏差分别为 0.9%-1.1%、1.3%-2.2%、1.6%-3.2% （n=9），平均回收率分别为 102%、103%和 99.0%。方法准确可靠，已用于尿样 中 α-萘酚、β-萘酚和 1-OHP 的同时测定。 本文第四章应用共振光散射技术建立了 1-羟基芘检测的新方法。研究表明： 在 pH6.5 的 Tris-HCl 缓冲溶液中，以 SDBS 为增敏增稳剂，灿烂绿与 1-羟基芘形 成离子缔合物，导致体系共振光散射强度大大增强，体系最大 RLS 峰位于 467.6nm ，其强度与 1- 羟基芘浓度呈 良 好 的 线性关系。方法的 线性范围为 4.3-1091.3μg/L，相关系数 r=0.9994，检出限 1.3μg/L，RSD=2.2%-5.8%，平均回 收率为 98.0%。已用于人尿中痕量 1-羟基芘的测定，结果与常规的高效液相色谱 法一致。 关键词：多环芳烃，羟基多环芳烃，1-羟基芘，α-萘酚，β-萘酚，β-环糊精，同 步荧光法，反相高效液相色谱-紫外检测器，共振光散射，灿烂绿 Novel Methods for Determination of Hydroxyl Polycy