多肽与pH响应的聚β氨基酯共聚物自组装与化疗药物的协同抗癌研究-应用化学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Dissertation Submitted to Hebei University of Technology for The Master Degree of Applied Chemistry RESEARCH OF SELF-ASSEMBLED PEPTIDE CONJUGATED pH- RESPONSIVE POLY(β-AMINO)-ESTERS AND CHEMOTHERAPEUTIC DRUGS FOR ENHANCED CANCER THERAPY by Hou Chunyuan Supervisor: Prof. Li Xiaojun Prof. Wang Hao May 2015 万方数据 万方数据 河北工 河北工业大学硕士学位论文 摘 要 近年来纳米技术在癌症治疗方面起到了越来越重要的作用。纳米药物能够通过 增强渗透保留效应(EPR)延长药物在体内的保留时间，在肿瘤部位特异性富集，从而 增强药物的治疗效果。由于多肽类药物具有容易合成，在体内容易降解，不会引起 毒副作用的优点，也逐渐引起了研究者们的注意。 因此，我们通过 1,4-共轭加成反应将毒性的多肽(KLAKLAK)2(简称 KLAK)与 pH 响应性的 PEG 修饰的聚 β 氨基酯化合物共价相连，通过动态光散射(DLS)和透射电 子显微镜(TEM)测试证明了共聚物在 pH7.4 条件下能够自组装形成胶束状的 pH 响应 性的纳米粒子。通过溶酶体共定位实验，证明了 P2-KLAK 胶束的内吞途径；通过 JC-1 试剂盒分析，证明了线粒体导致的细胞凋亡；通过 CCK-8 试剂盒分析，证明了 P2-KLAK 胶束能够增强对癌细胞 MCF-7 的毒性。P2-KLAK 胶 束比游离的多肽 KLAK 毒性大，这可能是该胶束通过内吞途径有效地进胞和随后对线粒体的破坏导 致的。在 P2-KLAK 胶束内包裹抗癌药物阿霉素(DOX)实现了化学治疗药物和多肽类 药物的共同转移和酸引发的细胞内释放。包裹阿霉素的 P2-KLAK 胶束的毒性高于包 裹阿霉素的 P2 胶束和不包裹阿霉素的 P2-KLAK 胶束，表明其能够增强杀死癌细胞 MCF-7 的能力。最后，将 MCF-7 细胞异种移植到裸鼠体内，进行体内肿瘤成像和生 长抑制实验，证实了包裹阿霉素的 P2-KLAK 胶束由于能够在肿瘤部位特异性地富 集，有效进入细胞，使治疗药物在细胞内可控释放，从而有效地抑制肿瘤生长。 关键词：多肽，聚 β 氨基酯，自组装，胶束，pH 响应性，化疗药物，肿瘤，治疗 I 多肽与 多肽与 pH 响应的聚 β 氨基酯共聚物自组装与化疗药物的协同抗癌研究 II 河北工 河北工业大学硕士学位论文 ABSTRACT Nanotechnology has played an important role in cancer therapy in recent years. The nano-drugs can elevate therapeutic efficacy of drugs through longer retention time in the body and specific accumulation at tumor sites via enhanced permeability and retention (EPR) effect. Peptide drugs have attracted increasing attention of researchers because they are readily synthesized, easily degradable in body, and do not cause serious toxic side effects. So, we prepared cytotoxic peptide (KLAKLAK)2 (called KLAK) conjugated pH- responsive PEG-poly(β-amino)-esters by 1,4-conjugate addition. The copolymers could self-assemble into micelle-like nanoparticles with pH-responsive property at pH7.4, which were measured by dynamic light scattering (DLS) and transmission electron microscopy (TEM). The endocytosis pathway of P2-KLAK micelles was proved b