蚕丝素蛋白肽聚乙二醇复合物的制备与生物相容性研究-生物医学工程专业论文.docxVIP

1.绪论 1.绪论 重庆理工大学硕士学位论文 重庆理工大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 PAGE PAGE 2 1. 绪论 引言 蚕丝蛋白是一种天然的蛋白质，是人类利用很早的蛋白质之一。蚕丝具有优雅的 光泽，柔软的手感，优良的吸湿性、保暖性、透气性以及良好的保健功能，一直用于 纺织行业,但作为纯天然生物高分子材料用于医用领域已经有很长历史[2] ，在一个世 纪以前蚕丝就被应用在医学上作为手术缝合线使用[3]。近年来随着蚕丝性能及应用的 研究和蛋白质工程学的进展，科学工作者根据其在生物整体、细胞、分子生物学三个 水平的结果也表明，蚕丝蛋白具有与活体组织良好的细胞亲和性、生物相容性、透气 性、可降解性等特点，在生物材料、精细化工等方面引起了人们的广泛关注，有关蚕 丝蛋白的性质和应用研究层出不穷[4]。近年来蚕丝多用途开发正向高新技术方面渗 透，国内外对丝素的应用正从传统的纺织领域积极向化妆品、食品等领域扩展，在生 物医学领域的探索，更是受到广泛关注，并且已取得了一系列的基础研究成果，显示 了巨大的应用潜力[5]。因此对丝素蛋白的研究无论从基础科学还是从应用科学来看， 都是很有意义的。 天然丝素蛋白在实际的使用中存在各种缺陷，如在药用材料领域使用时，由于易 在酸性条件下水解[6]，因此不能直接口服使用；在医用组织工程材料领域使用时，又 存在成型性差、不能形成三维多孔结构等缺点[7]。因此丝素蛋白往往需要进行改性后 才能使用，聚乙二醇对丝素蛋白的修饰改性就是其中的一大热点[8]。聚乙二醇 （Polyethylene glycol，PEG）是一种具有良好吸水性和生物相容性的合成高分子，在 化妆品、制药、化纤及食品加工等诸多行业中均有着极为广泛的应用。将丝素蛋白与 聚乙二醇结合，制备出一种性质稳定，又能在诸如医用、药用等多种领域使用的新型 高分子材料，具有可观的经济利益和社会效益。 1. 1 蚕丝素蛋白的组成结构与性能 1. 1. 1 丝素的组成 丝素蛋白含有 l8 种氨基酸，结构上由结晶区和非结晶区两部分组成。结晶区主 要由侧链较小的氨基酸残基组成，其中甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）和丝氨酸（Ser） 占了 85％，三者摩尔比约为 3：2：1，按一定的序列结构排列成较为规则的链段，因 此形成了结晶区，结晶区的肽链排列比较整齐密集。非结晶区域主要是由乙氨酸、丙 氨酸以外的氨基酸残基组成的，如苯丙氨酸（Phe）、酪氨酸（Tyr）、色氨酸（Trp） 等；这些氨基酸的残基较大，且在侧基中具有活泼的基团，这就阻碍了肽链成整齐而 密集的排列。在非结晶区中由于集中了具有活泼官能团的氨基酸残基，所以丝素与其 它物质发生化学作用时，主要是在这一部分[9]。 1. 1. 2 丝素蛋白的结构 丝素蛋白是蚕丝的主要成分，它以反平行 β-折叠为基础，形成直径为 10nm 的微 纤维，无数微纤维组成直径约为 1um 的细纤维，再沿纵轴排列成直径为 10～18um 的 单纤维，即丝素蛋白纤维。一般认为丝素蛋白是由两种不同分子量的亚单元组成，其 中大亚单元的分子量为（2.8～3.0）×105，小亚单元的分子量为（2.0～3.0）×105。丝 素蛋白的氨基酸排序片断 Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ser 占丝素构成的 70％，称为“结构 区”，而以酪氨酸为中心，天门冬氨酸、谷氨酸等所组成的序列为易感受反应的活性 部位[10]。 丝素是一种纤维状蛋白，由无定形区和结晶区构成，它的结晶度一般在 50%～ 60%，较大侧基的氨基酸主要存在于无定形部分，而极性氨基酸在丝素蛋白无定形区 中的含量超过在结晶区中的含量。其中结晶区包括 2 种结晶形态，分别称为 SilkⅠ型 和 SilkⅡ型。SilkⅠ晶体立体构象呈曲柄形，是介于 β-折叠与 α-螺旋之间的一种中间 形态，SilkⅡ晶体呈反平行 β-折叠结构，属单斜晶系，由肽链构成折叠层，再由折叠 层形成整个 SilkⅡ晶体[11,13]。在 SilkⅡ中，肽链的链段排列整齐，相邻链段之间的氢 键和分子间引力使它们结合的相当紧密，抵抗外力拉伸的能力强，柔软度低，在水中 难以溶解，对酸、碱、盐、酶及热的抵抗力较强。无定形丝素中肽链的链段排列不整 齐，链段之间的结合力较弱，易溶于水，柔软度高，抵抗外力拉伸的能力弱，吸湿性 强，对酸、碱、盐、酶和热的抵抗力较弱[12]。 1. 1. 3 丝素蛋白的性质 1.1.3.1 理化性质 ①丝素蛋白具有良好的吸水性，因此吸水率和回潮率较高，虽然不溶于水，但与 水接触时能吸收一定量的水，同时体积膨胀，吸水后其增重量可达30~35 %，体积膨 胀程度高达30~40 %。一般情况下，水只会引起丝素膨润，不会使丝素溶解。但若是 高温及长时间处理，也会对丝