产普鲁兰多糖菌株的选育及最佳发酵条件的研究-食品科学与工程专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 上海海洋大学硕士学位论文 答辩委员会成员名单 姓名 工作单位 职称 备注 李友荣 华东理工大学 教授 主席 蔡海波 华东理工大学 教授 委员 严维凌 上海市食品研究所 教授级高级 工程师 委员 王婧 上海海洋大学 工程师 秘书 答辩地点 上海市食品研究所 答辩日期 2014.05.30 上 上海海洋大学硕士学位论文 产普鲁兰多糖菌株的选育及最佳发酵条件的研究 摘 要 普鲁兰多糖是由出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）发酵产生 的一种胞外多糖，其特殊的结构赋予了它许多优良的理化性质，广泛 应用于食品、制药、化工、石油及其它制造业，需求较大。在本文中， 以出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）IFO 4464 菌体形态研究入手， 分析了不同生长时期菌体变化的情况；分别研究了温度、初始 pH 和摇 床转速对普鲁兰多糖产率的影响；最后，采用响应面法（Response surface methodology）优化了普鲁兰多糖发酵培养基。 在出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）IFO 4464 菌体形态变化 研究实验中，绘制了其生长曲线。由实验结果可以得到，出芽短梗霉 （Aureobasidium pullulans）IFO 4464 在培养时间 36~48 h 时处于生长 对数期。 在响应面法优化响应面法优化了普鲁兰多糖发酵培养基实验中， 通 过 单 因 素 实 验 确 定 发 酵 培 养 基 最 佳 碳 源 和 氮 源 ； 采 用 Plackett-Burman 实验以筛选出影响普鲁兰多糖发酵的显著影响因素； 选取蔗糖、硫酸铵和硫酸镁三个显著影响因子做响应面分析，确定发 酵培养基最佳配比。实验结果表明：蔗糖、硫酸铵及硫酸镁添加量对 普鲁兰多糖的产量有较为显著的影响，且蔗糖添加量与硫酸铵添加量、 蔗糖添加量与硫酸镁添加量有显著的交互作用，硫酸铵添加量与硫酸 I 镁添加量交互作用相对不明显；发酵培养基最佳配比为：蔗糖 59.8 g/L、 硫酸铵 0.7 g/L、硫酸镁 0.3 g/L、磷酸二氢钾 5.0 g/L、氯化钾 0.5 g/L、 氯化钠 1.5 g/L、酵母浸膏 2.5 g/L，多糖产量可达 21.92 g/L，与初始发 酵培养基相比提高了 10.2 %。 在发酵过程中，培养温度、发酵液初始 pH 和摇床转速是影响普鲁 兰多糖产量的重要因素。实验结果表明，对于出芽短梗霉 IFO 4464 产 普鲁兰多糖的发酵，培养温度选择 28 ℃、发酵液初始 pH 选择 6、转 速选择 220 r/min 的条件下培养时，普鲁兰多糖的产量达到最大值；最 后观察了不同生长时期时的菌体形态，此时发酵液中有大量的芽生孢 子产生，而且发酵液有明显的粘稠感，可以推断，芽生孢子代谢产生 大量的普鲁兰多糖。另外，出芽短梗霉 IFO 4464S 生长过程中主要有 3 中菌体形态：菌丝体、芽生孢子、有隔孢子。 关键词：出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans），普鲁兰多糖，发酵， 生长曲线，响应面法 II The strain breeding and fermentation parameters of pullulan produced by Aureobasidium pullulans Abstract Pullulan, a kind of exopolysaccharides produced by Aureobasidium pullulans, has a number of favorable properties given by its special structure. Pullulan has been widely used in food industry, pharmacy, chemical engineering, petroleum and other industries. In this paper, the cellular morphogenetic changes of Aureobasidium pullulans IFO 4464 were optimized and then the effects of culture temperature , initial pH and agitation rates on the production of pullulan were researched. At last , response surface methodology was used to investigate the effects of three facto HYPERLINK