侧壁沟通式十字交叉微圆通道装置中明胶微液滴的生成及操纵-生物学专业论文.docxVIP

重庆大学硕士学位论文中文摘要 重庆大学硕士学位论文 中文摘要 I I 摘 要 微流控技术（microfluidics）作为一门多学科交叉的研究领域，越来越受到重 视，其中作为生物实验缩微重要方向的微流控芯片液滴制备技术，成为近年来快 速发展的热门方向。本论文主要探讨基于微丝模塑工艺的侧壁沟通式十字交叉微 圆通道装置中明胶微液滴的制备与操纵。 首先，基于微丝模塑工艺探讨加工十字交叉、侧壁沟通的微圆通道装置，探 讨了在聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）基板上结合微丝模塑工艺来加工具有新结构 构型的微流控通道装置的可能性。并以十字交叉微通道为基础，通过封堵交叉通 孔一侧的通道，构建了 T 型侧壁沟通微圆通道。 其次，在上述加工的微通道装置基础上，探讨气/液、液/液两相微流控条件下 微液滴的生成行为，尤其侧重于考察液/液两相操纵下明胶液滴的生成情况。实验 结果表明：生成明胶液滴所需要的最小的分散相/连续相流量比与油相种类、通道 直径以及明胶溶液的浓度有关。① 微通道直径为 150μm，分散相为 2%的明胶溶 液时，硅油和食用油分别作为连续相的最小流量比分别为 75 和 15。② 食用油作 为连续相，2%的明胶溶液为分散相，在微通道直径为 150μm、100μm、80μm、60μm 和 40μm 时，最小流量比分别为 15、22.5、27.5、36.5、51 才能生成明胶液滴。③ 微通道直径为 150μm，食用油作为连续相，明胶溶液为分散相且浓度分别为 1%、 2%、3%、4%、5%时，最小流量比相应为 12.5、15、20、31.5、41。通过这一系 列试验证明明胶液滴产生的最佳条件是微通道直径 150μm，连续相为食用油，分 散相为 2%（w/v%）明胶溶液浓度，两者流量比为 16 时可以稳定得到直径为 140μm 的明胶液滴，生成频率为 6 个/min，并且此时的液滴呈球状即明胶微球，进一步说， 在交叉沟通微圆通道中我们制备出了明胶微球。 第三，对比了在 T 型通道与十字交叉通道中生成明胶液滴所需要的分散相与 连续相的流量比值，T 型通道中由于明胶出口单一，所以生成液滴所需压力更小， 前者得到明胶液滴的最小流量比值为 9，而后者则是 15，生成明胶液滴的频率分 别为 36 个/min 和 2 个/min。另外，在新改进的 PDMS/PMMA 微通道中实现了明 胶微液滴的生成及操纵（液滴收集）。 最后，基于上述微通道装置中液滴生成行为的认识，进一步探讨了在微通道 流动流程下游的交叉通孔处，操纵液滴实施固定的可能方式。利用侧壁沟通式十 字交叉微圆通道的特殊结构构造以及作为分散相的明胶溶液的生物化学特性，将 生成的液滴用不同的方法在交叉通孔处进行了固定和收集。明胶（或琼脂）溶液 在温度降低到凝固点以下时会变成固态，利用氮气压力或连续相的流动将生成的 II II 液滴推动到交叉通孔表面，然后将整个芯片装置置于 4℃冰箱中冷存，明胶（或琼 脂）液滴由于受冷凝固便固定于了交叉通孔处。通道成形前布微丝时，在微丝表 面点微量油滴，固化后在芯片中便形成依附于微通道的孔状结构。交叉通孔处形 成的微液滴流动到气孔时，便被“截留”固定于此处。而对液滴的应用也做了一定的 初探，成功的操纵明胶液滴对细胞的包裹和单细胞的分离，并对在交叉沟通微圆 通道内进行细胞培养做了简单介绍。 关键词：微丝模塑，微通道，明胶液滴，流量，交叉通孔 重庆大学硕士学位论文英文摘要 重庆大学硕士学位论文 英文摘要 PAGE PAGE IV ABSTRACT Microfluidics is becoming more and more important as an interdisciplinary technique．Microfluidic chip droplets generation technology which plays an inportant role in biological miniaturization experiment, becomea the rapid dvelopment direction recent years. In this thesis, based on polydimethylsiloxane (PDMS) microfilament molding method, through-hole-on-wall of crossed round microchannels device are used to generate gelatin micro-droplets. First, we report a microfilament molding method to build through-hole-on-wall