对重金属铬污染环境具修复作用的真菌初步研究-食品工程专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 上海海洋大学硕士学位论文 答辩委员会成员名单 姓名 工作单位 职称 备注 李友荣 华东理工大学 教授 主席 蔡海波 华东理工大学 教授 委员 严维凌 上海市食品研究所 教授级高级 工程师 委员 胡洁云 上海市食品研究所 工程师 秘书 答辩地点 上海市食品研究所 答辩日期 2015.06.05 上海海 上海海洋大学硕士学位论文 对重金属铬污染环境具修复作用的真菌初步研究 摘 要 随着电镀、制革、印染等工业技术的快速发展，金属铬(Cr)被广 泛用于工业生产中。未经处理的从上述过程中产生的含 Cr(VI)废液、 废渣直接排到环境中，会对环境造成严重污染，同时，Cr(VI)对生物 系统有很强的毒性，对生物体有致突变、致癌和致畸作用，属于一类 污染物。并且 Cr(VI)水溶性高、易移动，因此很容易转移，游离出最 初污染的部位。而 Cr(III)相对惰性比较强，不易移动，生物利用度低； 此外，Cr(VI)化合物的毒性约为 Cr(III)的 100 倍，致突变率约为 Cr(III) 的 1000 倍。 现有的化学和电化学处理过程一般是将水溶液中的 Cr(VI)的还原 为 Cr(III)，随后调整溶液的 pH 值至接近中性的条件下生成沉淀从而 降低 Cr(VI)的浓度。然而，这些方法被认为是不可取的，因为处理过 程中需要使用昂贵的化学试剂，而且去除效率难以满足实际的需求， 另外在修复过程中会产生大量不易收集回收的化学污泥。生物修复的 方法还原 Cr(VI)，即利用耐铬微生物将 Cr(VI)还原成较稳定、毒性较 低的 Cr(III)进而将其吸附被认为是一种有效解决 Cr(VI)污染环境的方 I 法；微生物在生物还原 Cr(VI)中的潜在作用，已在各种可以还原的实 验中得以证实。另外，生物修复法所需设备简单，投资小，对环境的 危害小，在 Cr(VI)去除方面值得推广。 本实验从上海某废弃钢铁厂内采集土壤样品，测定土壤中重金属 含量确定耐重金属菌株存在的可能性；利用选择性培养基孟加拉红培 养基从该土壤样品中分离出 20 株霉菌，再利用 Cr(VI)耐受性和 Cr(VI) 修复性实验筛选出一株对 Cr(VI)有较强耐受能力和修复能力的菌株 M-13，并对其进行了分子生物学鉴定和形态学鉴定，鉴定结果表明 M-13 为橘绿木霉 HYPERLINK /names/NamesRecord.asp?RecordID=107345 Trichoderma citrinoviride M-13。 从废弃钢铁厂内土壤中分离出一株对 Cr(VI)具有高去除性的微生 物，对其生物学特性进行研究。采用孟加拉红培养基对上海某废弃钢 铁厂内重金属污染土壤中耐 Cr(VI)真菌进行分离筛选纯化，用菌落形 态和 18S rRNA 序列分析鉴定菌株,研究菌株的 Cr(VI)耐性和去除率， 分析不同影响因素对其去除 Cr(VI)的影响。结果得出 M-13 为橘绿木 霉（ HYPERLINK /names/NamesRecord.asp?RecordID=107345 Trichoderma citrinoviride），能耐 1.7 mmol/L 的 Cr(VI)，且每克菌 丝吸附 0.5 mg 以上的 Cr(VI)。菌株生长至 72 h 时菌丝含量达到最大， 培养至 42 h 的菌丝对 Cr(VI)去除率最高。在 pH 为 1.09 左右，温度在 28 ?C，菌丝加入量在 0.5 g（干重），Cr(VI)初始浓度为 100 mg/L 时， Cr(VI)去除率最大，为 99.3%，几乎将 100ml 溶液中的 Cr(VI)完全去 除。橘绿木霉 M-13 能较好的去除 Cr(VI)离子，可以作为试验材料应 用于生物修复废水中 Cr(VI)的研究。 II 本课题利用紫外灯照射对菌株进行诱变，以分离鉴定出的绿色木 霉菌株作为出发菌株，利用紫外诱变进行处理，得到了耐 Cr(VI)性强， 还原效率高、且具有一定遗传稳定性的菌株 M-13M（mutagenesis）； 对该诱变菌株的耐 Cr(VI)性和修复 Cr(VI)能力进行实验验证。结果表 明，当诱变的条件为：紫外灯的照射瓦数为 30 W，垂直照射距离为 30 cm，照射时间为 120 s 时，橘绿木霉 M-13 的致死率为 92.3％，在 此条件下选取菌株 M-13M4，具有良好的遗传稳定性。利用该菌株， 在修复条件为：初始菌丝投入量为 0.17 g、初始 Cr(VI)浓度为 120 mg/L、 初始 pH 值 1.21 时，Cr(VI)的修复率能够达到 94.2％。结果表明该株 橘绿木霉 M-13 经过紫外诱变后，其耐 Cr(VI)能力及 Cr(VI)修复能力 有了一定程度的提高。 研究菌株 M-13 对 Cr(