茶树毛状根的诱导及其培养体系的建立-茶学专业论文.docxVIP

摘要 为建立发根农杆磁转化茶树的遗传转化体系，对发援农杆菌转化茶树试管葱、 筛选被野生农杆菌转化的大回茶树根系以及毛状根的诱导、培养进行了研究。 ffl 发根农杆菌如02 、158341000、1025、1601 感染大红、安化圈[l十、东湖早 3 个茶附品种试管茵的不同外植体。只有发根农杆菌 1025 感染具有少量叶片的大红 茎段外楼体，在1!2MS 培养基上培养出 d ，获得了毛状粮。 大田茶树的毛状根从根诱导的戴伤组织上发生。供试的乌牛早、龙井 43、安化 部叶、精E十齐、苹云 5 个品种，在 BA 1mg/L，IBA 3mg/L 的 MS 培养基都诱导出了愈 伤组织，不同品种的愈伤组织诱导惠存在明显差异。只有安化圈叶、乌牛早的根愈 伤组织在 MS 培养基上诱导出了毛状根。不添加队的培养基出现愈伤组织的时间矩。 大阪茶树根诱导的毛状根与感染发粮农杆离后诱导的毛状报费生长特性基本榕 间。毛状根的继代培养基以 pH 4. 仕5. 5 为宜，高于 6.0 时，毛状根的生长受到抑制。 毛状根;在 1/2MS 改良主寄养基上生长优于赂、忌、暂且 itε 培养基。培养基中，无氨态氮 时毛状根只分校而伸长↑曼;添加 IBA O. lmg/L 、A 1 (NO，)，O. 1mmo l/L 对毛状根的分校、 生长有促进作用: 3艳的蕉糖，毛才决很变箱，并产生愈伤组织。 毛状恨在1I2MS 改良培养液中振荡培养，第 8 d J垃入快速生长期， 20 d 可增长 S 倍。 毛状根通过长时间多次继代培养后，仍保持原来分校多、伸长快等特性;而正 常根在继代培养过程中，根主主本不伸长，极少产生分梭，这些特点可以作为筛选毛 状根的基本依撼。 关键词:茶树:根:发根农杆菌:遗传转化:毛状根:培养 Abstract In ordering 10 establish genetic transformation system of tea plant induced by Agrobacteríum rhizogenes ，the Agrobacterium rhizogenes transforming to tube-shoots and selecting f￥om roots naturally infected by wild Agrobacterium rhizogenes in tea plantation and the hairy roots induced and cultured were studied. Agrobacterium rhizogenes strains 1000，1025，1601，9402，15834 were employed to induce hairy roots from different explants of dillèrent varietìes of tea plant for Dahong， Anhuayuanye ，Donghuzao. Hairy root only was sllccessful attained from stem explants of Dahong， which with lìttle leaf infected with Agrobacterium rhìzogenes strain 1025，af无er clllturing on 1/2MS medium for 50 days Hairy roots only induced from root callus of Anhua归anye ，Longjing 43 cultured in field. Callus can be induced from r.∞ts of five varieties of tea plant Wuniuzao ，Longjing 43，Anhuayuanye ，Zhuyeqi and Pingyun which cultured on MS medium. ∞.ntaining 1 mg/L BA and 3 mglL IBA ，出e inducement frequency of callus from different varieties shows obvious difference. No adding BA to medium ，the time of callus induced from roots ofTea plant would be shorted Natural hairy roots and artificially infection hairy roots show similar growt