WAVETM生物反应器中的Cytodex微载体细胞培养工艺.PDF

GE Healthcare Application Note 28-9576-34 AA 疫苗 WAVETM 生物反应器中的Cytodex™ 微载体细胞培养工艺 关键词：MDCK ，Vero，细胞培养，微载体，Cytodex，WAVE，疫苗 摘要 介绍 WAVE Bioreactor 系统多用于悬浮细胞的 与滚瓶 (Roller Bottle) 中的细胞培养不同， 培养。然而，用于细胞治疗和疫苗生产的 贴壁细胞在微载体上的培养使它相对容易 多种细胞为贴壁依赖型的，需要一个可贴 进行生产工艺的规模放大。此外，微载体 附的生长表面。在本研究中，Cytodex 微 使细胞能够在生物反应器中扩增，与多个 载体被应用在 CellbagTM 生物反应器中以 小T 型瓶等塑料培养容器相比，生物反应 扩增Madine-Darby Canine Kidney (MDCK) 器可以提供更好的工艺参数自动控制，降 和Vero 细胞。为了优化细胞贴附，测试了 低劳动强度的同时减少污染的危险。一次 两种细胞株的不同摇动混合条件。我们发 性生物反应器的使用减少了投资成本、提 现培养基成分对细胞贴附有显著的影响； 高灵活性 （简化批次间的轮换准备等操 例如在低血清培养基中的 MDCK 和 Vero 作），消除了生产容器清洗验证的需要。 细胞，用间歇式和连续摇动混合都可以使 细胞贴附到微载体上。然而，在无血清条 WAVE Bioreactor 系统是设计用于人、动 件下，Vero 细胞在间歇式摇动混合下可以 物、植物和昆虫细胞培养的一次性发酵设 获得高贴壁率。生长在 WAVE Bioreactor 备，并可以用于细菌和真菌的培养。WAVE 系统中的MDCK 细胞可以被放大到2 L 和 Bioreactor 系统不需要清洗或灭菌，这减少 10 L工作体积。细胞达到最大密度为3×106 了生物制药生产中工艺验证的需要。尽管 细胞/ml 。Vero 细胞在 2 L 工作体积下的 WAVE Bioreactor 系统多用于悬浮细胞的 Cytodex 1 和Cytodex 3 微载体上培养，无 培养，本文的研究表明WAVE 反应器也适 6 血清条件下达到 1.4×10 细胞/ml 最大密 合微载体上贴壁细胞的培养。 度。用转瓶同样条件可以获得相同密度的 Vero 细胞，WAVE 中细胞生长速度更快。 本文描述了MDCK 和Vero 细胞在WAVE Bioreactor 系统中 Cytodex 微载体上的培 数据显示WAVE Bioreactor 系统是成功用 养。我们对微载体培养所必需的参数如最 于MDCK 和Vero 细胞微载体培养的通用 佳摇动混合条件和工作体积范围、细胞贴 平台，可以方便的进行规模放大，是对传 附效率、最大细胞密度以及从2 L 工作体 统搅拌罐生物反应器或转瓶的一种快速和 积放大到10 L 的可行性进行了深入研究。 方便的替代系统。 使用细胞特异性的参数如贴附、生长速率 和最大细胞密度等，对 WAVE Bioreactor