病毒性肝炎幻灯片教学教案.ppt

; (一)甲型肝炎病毒(HAV); 许多灵长类动物，如黑猩猩、狨猴、狒狒、恒河猴、猕猴、短尾猴等均对HAV易感。1979年在狨猴原代肝细胞中培养HAV获得成功。肝癌细胞，二倍体成纤维细胞，猴肾细胞和Vero细胞等，细胞培养中HAV生长复制缓慢，接种后约需4周才可检出抗原。一般不引起细胞病变，不阻断宿主细胞的蛋白质合成，在细胞内易形成持续感染状态，很少释放到细胞外，经多次传代后，HAV的致病性大大减弱甚至消失，据此已制备出HAV减毒活疫苗。;生物学特性 HAV对外界抵抗力较强，耐酸碱，能耐受60 ℃ 30分钟，室温生存l周，干粪中25 ℃能存活30天；在贝壳类动物、污水、淡水、海水、泥土中能存活数月。80 ℃ 5分钟或100 ℃ 1分钟才能完全灭活。在-20 ℃ ~- 70 ℃数年后仍有感染力，在甘油内- 80 ℃可长期保存。对有机溶剂较为耐受，在4℃20％乙醚中放置24小时仍稳定。采用紫外线、余氯 ，甲醛可将其灭活。; (二)乙型肝炎病毒;1．形态及生物学特性;HBV的生物学特性 HBV的抵抗力很强，对热、低温、干燥、紫外线及一般浓度的消毒剂均能耐受。在37℃ 可存活7天，56 ℃ 6小时，在血清中30 ℃~32 ℃可保存6个月，-20 ℃可保存15年。煮沸10分钟、65 ℃ 10小时或高压蒸气消毒可被灭活，对0.5％过氧乙酸敏感。; 2.基因组结构及编码蛋白; S区又分为前S1、前S2及S三个编码区，分别编码包膜上的前S1蛋白(preSl)，前S2蛋白(preS2)及HBsAg。三者合称为大分子蛋白；preS2与HBsAg合称为中分子蛋白；HBsAg则称为小分子蛋白或主蛋白。大、中、小分子蛋白的分子量分别为39kD、33kD和24kD。前S蛋白有很强的免疫原性，HBV的嗜肝性主要由前S蛋白与肝细胞受体之间的识别和介导的。 HBsAg的抗原性比较复杂，有一个属特异性的共同抗原决定簇“a”和至少两个亚型决定簇“d／y”和“w／r”，据此将HBsAg分为l0个亚型，其中两个为混合亚型，主要型是adw，adr，ayw和ayr。各地区的亚型分布有所不同，我亚国长江以北以adr占优势，长江以南adr和adw混存。根据HBsAg抗原性表现进行的分型与基因分型并不完全一致，分型在流行病学上有一定意义，在其他方面的价值则有待探讨。; C区又分为由前C基因和C基因，编码HBeAg 和HBcAg。从前C基因开始编码(含前C基因和C基因)的蛋白质经加工后分泌到细胞外即为HBeAg，从C基因开始编码(仅含C基因)的蛋白质为HBcAg。在HBV感染者中，前C基因1896位核苷酸是最常发生变异的位点之一，变异后导致蛋白表达终止，不能产生HBeAg，形成HBeAg阴性的前C区变异株。; P区是最长的读码框架，编码一个大分子碱性多肽，分子量约为90kD，含有多种功能蛋白，包括具有反转录酶活性的DNA聚合酶、RNA酶H等，参与HBV的复制。; X基因编码X蛋白，即HBxAg，分子量约16kD。HBxAg具有反式激活作用，可激活HBV本身的、其它病毒的或细胞的多种调控基因，促进HBV或其它病毒(如艾滋病毒)的复制。另外，HBxAg在原发性肝细胞癌(HCC)的发生中可能起重要作用。; HBV基因组易突变，基因变异主要发生在前基因组mRNA反转录为负链DNA的过程中。迄今发现的几十个HBV分离株全序列中，没有发现完全相同的基因组序列。大部分突变为沉默突变，无生物学意义。但某些关键位点的突变可引起HBsAg亚型改变或HBsAg阴性乙型肝炎(在S基因)、可引起HBeAg阴性／抗HBe阳性乙型肝炎(在前C区)、可致抗HBc阴性乙型肝炎(在C区)、可导致复制缺陷或复制水平的降低(在P区)。HBV基因组变异除了影响血清学指标的检测外，可能与疫苗接种失败、肝炎慢性化、重型肝炎和肝细胞癌(HCC)的发生等有关。; 对HBV易感的动物很局限，灵长类动物如黑猩猩是较理想的动物模型。在体外培养HBV尚未取得满意效果，但通过HBV DNA转染获得的一些细胞株(如HepG2)则可支持完整病毒的复制和病毒蛋白的分泌。;HBV的抗原抗体系统： 1. HBsAg与抗HBs ：成人感染HBV后最早l一2周，最迟11一12周血中首先出现 HBsAg ，少数可延续6个月。IgG型抗体可长期存在。IgM是近期感染的标志，IgG则是过去感染的标志。;急性自限性HBV感染时血中HBsAg大多持续l一6周，最长可达2。周(见图3—2)。 在无症状携带者和慢性患者中HBsAg可持续存在多年，甚至终身(见图3—3)。 ;