梧州地区鸭脚木蜂蜜花粉形态特征的研究.docVIP

梧州地区鸭脚木蜂蜜花粉形态特征的研究 　　摘 要：目的：研究鸭脚木蜂蜜花粉形态特征，并为鸭脚木蜂蜜的真假鉴别建立方法。方法：通过采摘鸭脚木成熟花粉、成熟的鸭脚木蜂蜜，采用显微镜和扫描电镜对花粉形态进行观察；结果：从鸭脚木原蜜中提取花粉粒与花药中的花粉特征图比，其特征基本一致、重复性高，即鸭脚木花粉极面观为近圆形，赤道面观为椭圆形，三沟萌发孔，表面有颗粒状纹饰。结论：本研究为采用花粉检验法判定梧州地区鸭脚木蜂蜜的种类、判断真伪和纯度提供了依据。 　　关键词：鸭脚木；花粉粒；形态；扫描电镜；显微检验 　　中图分类号： S896.4 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20170832014 　　前言 　　鸭脚木蜂蜜（Schefflera octophylla （Lour.） honey），属于岭南地区特有的蜂蜜品种。梧州是广西出口蜂蜜的主要口岸，对蜂蜜实施检验始于1970年，其品种原蜜分类为春蜜、冬蜜，主要产地是梧州、苍梧、桂平[1]。梧州行政区域范围内广泛分布有鸭脚木（Schefflera octophylla Harms），而且形成规模，保证了鸭脚木花蜜在梧州地区的产量与品质。由于梧州鸭脚木为野生植物，花期为每年11月―次年1月，其中最冷月（1月）平均11.9℃温度，而梧州本地的中蜂适宜于山区、半山区生态环境饲养，在气温9℃时仍能安全采集，另外由于中蜂长期在本地进化，对本地各类蜜源植物具有独特的辨别能力，所以鸭脚木花蜜特别适合本地中蜂采花酿造[2]。因为该花蜜在其它季节不能酿造，所酿造的蜂蜜多年来民间称为“梧州冬蜜”。酿蜜季节独特，是梧州冬季独有的蜜种。 　　1 鸭脚木蜂蜜的发展与研究进展 　　目前，我国虽然发布有GB/T 23194-2008《蜂蜜中植物花粉的测定方法》、GH/T 18796-2012《蜂蜜》、GB/T 30359-2013《蜂花粉》等标准，但是其中并没有关于鸭脚木花粉细胞形态、鸭脚木蜂蜜中花粉的形态特征及其检测方法的介绍 [4-6]。因此，有必要对鸭脚木花粉形态及其检测方法进行探索和研究。 　　2 鸭脚木花粉细胞形态的显微镜和扫描电镜观测 　　2.1 显微镜观察的材料与方法 　　2.1.1 实验材料 　　2014年、2015年，分别于梧州地区鸭脚木花集中成熟地区，在12月份盛花期采集成熟花药作为观察的材料。 　　2.1.2 实验方法 　　按GB/T 30359-2013标准中单一品种蜂花粉定性鉴别方法进行。花粉从刺破的成熟花药中释放得到。 　　2.1.3 计算方法 　　将采集的花粉分成3份，每份随机取10粒花粉进行大小的测量和统计，取其平均值和变异系数表示变化幅度。 　　2.1.4 观察与分析 　　梧州地区采集的在显微镜下观察到的花粉形态无明显区别（如图1所示），鸭脚木花粉为白色，花粉细胞呈近似球形，赤道面观为椭圆形，平均直径为 19.43um，变异系数为3.02%，极面观为近圆形，平均直径为21.40um，变异系数为3.17%，表面有颗粒?睢? 　　2.2 扫描电镜下观察的材料与方法 　　2.2.1 材料与方法 　　实验材料与4.1.1相同，将样品先用镊子将花药取出后，放入到PE小管中，干燥48h后，收集管内自然散出的花粉作为扫描电镜观察的材料，为了保证其纹饰的真实性，表面未经任何试剂处理。将待观察的样品用导电胶布固定在载物台上，使用TM3000台式扫描电子显微镜进行真空图像扫描，调节5kv，15kv不同的高压状态来观察样品，主要在×500、×2000、×10000倍数的视野下拍摄其花粉的形态、赤道面观、极道面观以及外壁纹饰等形态，并测量其极轴长（P），赤道轴长（E），计算花粉粒大小，以极轴长乘以赤道轴长（P×E）表示，计算极轴长和赤道轴长的比值（P/E），表示其形状。P/E在0.4～0.8为扁圆形，P/E在1.0～2.0为椭圆形，P/E在0.8～1.0为长椭圆形[7]。观察花粉的赤道面观，极面观形状，萌发器官和外壁纹饰特点， 用专业术语来描述。 　　2.2.2 观察与分析 　　研究中鸭脚木花粉形态上表现了遗传的稳定性，见图2（a），主要表现为： 　　极轴长（P）平均长度为21.489um，赤道轴长（E）平均长度为18.851um，如图2（a）中所示。由此可计算P/E平均比值为1.14，所以，根据上文所述，鸭脚木花粉应为椭圆形。 　　据研究表明花粉形态的演化主要反映在萌发器官和孢粉壁2个方面，而被子植物花粉萌发孔可大致分为2个基本的类型，具有单槽衍生和三沟衍生型[8]（王开发和王宪曾，1983）。结合图2（b）的观测结果，鸭脚木花粉的类型应为三沟衍生型。 　　从图2（b）中观察可知，鸭脚木花粉的三孔萌发沟并延伸达两级，从图2（c）中可观