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植物耐盐基因筛选的方法及其转基因育种的研究 　　摘要：植物对盐胁迫的耐受性是一个复杂的过程，涉及渗透调节、离子平衡和区域化及抗氧化防御系统等多个方面。综述了植物耐盐基因的筛选方法（抗性表达文库、耐盐突变体的图位克隆、基因差异表达和电子克隆）及通过这些方法所获得的部分耐盐基因；并在此基础上简述了耐盐基因在改良植物抵御盐胁迫方面的应用概况。 　　关键词：盐胁迫；耐盐基因；基因克隆；转基因育种 　　中图分类号：Q789 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）13-3078-05 　　DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2015.13.002 　　Screening Method of Salt Tolerance Genes and Transgenic Breeding in Plants 　　HAN Qiang1，2，HE Xue-lian1，2，ZHUO Ren-ying2，HE Zheng-quan1 　　（1. Biotechnology Research Center， China Three Gorges University， Yichang 443002， Hubei， China； 　　2.Research Institute of Subtropical Forestry， The Chinese Academy of Forestry， Fuyang 311400， Zhejiang， China） 　　Abstract： Salt stress tolerance of plant is a complex process involving in osmotic adjustment， ion balance and regionalization and antioxidant defense system. The screening method for plant salt tolerance genes （resistance expression library construction， Map-based cloning of salt-tolerant mutant， differentially expressed genes and electronic cloning） and some salt tolerance genes obtained by these methods were reviewed， and based on this， the general situation of the application of salt-tolerant genes improving plants salt stress tolerance was briefly discussed. 　　Key words： salt stress； salt tolerance gene；gene cloning； transgenic breeding 　　高盐环境严重影响植物的生长和发育，是造成作物减产的主要原因之一，高盐环境甚至导致作物减产50%以上，严重制约了现代农业的发展。部分地区由于降雨量少、海水倒灌以及采用大棚种植，土壤中盐分日积月累，导致世界范围内土壤盐渍化日趋严重和可耕地日趋减少。研究植物耐盐胁迫的分子机制，寻找改良植物耐盐性的有效方法已成为植物分子生物学家研究的热点。植物耐盐机理涉及多种基因和分子的协调作用[1]，一般来讲，植物的耐盐性与盐分的吸收、运输、分配、生物膜功能、离子区域化作用及渗透调节物质的合成和积累密切相关[2]。对于植物耐盐基因工程来讲，获得关键耐盐基因及其功能鉴定显得尤为重要。本文综述了近几年来耐盐基因的主要筛选方法（抗性表达文库、抗性突变体的图位克隆、基因差异表达、基因电子克隆）和耐盐相关基因及其在植物改良方面的应用。 　　1 耐盐基因筛选表达文库 　　通过转基因技术提高植物耐盐性的基础是了解植物耐盐的分子机制和耐盐相关的基因，而解决这两个问题首先是要克隆到足够多的耐盐相关基因。目前，主要是通过构建cDNA文库和基因组文库筛选法大规模筛选耐盐相关基因。 　　1.1 cDNA-文库 　　cDNA是由信使RNA反转录而来的，它代表特定的组织材料在特定阶段所表达的基因，排除了基因组文库中内含子序列对筛选相关性状基因的影响，使筛选相关基因更加简单。例如cDNA-酵母表达文库，作为生产真核异源蛋白的宿主菌，酵母集分子遗传操作、原核微生物的生长性质、真核蛋白质的翻译后加工修饰等特点于一体，并且繁殖快，操作简单，是一种研究遗传学和分子生物学的有效工具，在挖掘耐盐资源的研究中得到广泛应用。