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植物多糖的应用的研究进展 　　摘要：植物多糖广泛存在于生物体中，是生物体重要的营养物质，同时在生命活动中发挥重要的功能，如抗衰老、抗肿瘤、免疫促进、抗炎、抗病毒和降血糖等。本文就近年来植物多糖生物学功能研究进展做了简要评述。 　　关键词：植物多糖，分离纯化，生物活性 　　多糖（polysaccharides）又称多聚糖，是一类天然大分子物质，广泛存在于动物、植物和微生物中，是生物有机体内普遍存在的一类生物大分子，目前报道来源于中药的多糖已超过200种，且它们中的大部分都是从植物中分离和提纯得到。近年来，大量药理及临床研究表明，药用植物多糖如牛膝多糖、黄芪多糖、香菇多糖、芦荟多糖、酵母多糖、壳聚糖等是一种良好的免疫调节剂，它能激活免疫受体，提高机体的免疫功能，具备多种生物学功效。 　　一、多糖的提取、分离与纯化 　　提取多糖首先要根据多糖的存在形式及提取部位的不同决定在提取之前是否作预处理，对于含大量色素、脂肪酸等脂溶性成分的样品需脱脂，去除单糖、低聚糖等杂质。脱脂后的残渣或不需要脱脂的原料常用水作溶剂来提取多糖，此外按需要也可用碱性水液、氯化钠溶液或1%醋酸溶液作溶剂，温度控制在90-100℃，时间4-6 h，反复提取2-3次。一般植物多糖提取多采用热水浸提法。酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取，同时超滤法、超声提取和微波提取也是近年用到的新型提取技术。 　　用水或稀碱水提取的多糖常含有蛋白质，常用的除蛋白方法有Sevag法、三氟三氯乙烷法或三氯乙酸法，前两者多用于微生物多糖，后者多用于植物多糖。脱除蛋白后，用一定浓度的乙醇沉淀，沉淀物再经过DEAE-纤维素、SenhadxeA25，SenhadxeG50，DEAC-Cellulose等柱层析分离纯化。用乙醇沉淀是一种从溶液中定量回收多糖的简单方法，其原理是多糖溶于热水而不溶于乙醇等有机溶剂，因而可将多糖用乙醇沉淀出来。由于不同性质或不同分子量的多糖沉淀所需的乙醇浓度不同，故乙醇沉淀同样也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离。要根据具体情况使用不同浓度的乙醇，其中需要考虑的包括多糖的浓度及盐浓度。 　　二、植物多糖生物学功能研究进展 　　1.增强机体免疫 　　免疫系统是生命的卫士，是机体的防御系统。包括免疫器官、免疫细胞和免疫分子，可特异性地或非特异性地清除侵入机体的异物。植物多糖具有免疫增强作用，对非特异性免疫或特异性免疫均有促进作用。多糖本身也可作为一种抗原，刺激机体产生相应的抗体，但作用较弱。用肺炎球菌多糖皮下注射小鼠可刺激小鼠产生特异的免疫球蛋白M（Ig M）抗体，在有霍乱毒素作为佐剂时还可刺激产生特异的免疫球蛋白A（Ig A）抗体。用熟地、当归为主的复合多糖口服250mg/Kg体重用于雏鸡，可使雏鸡免疫器官指数明显升高，能使环磷酰胺所致免疫抑制逆转至正常水平或正常以上的水平，这也表明中药多糖具有免疫调节剂的作用。 　　研究表明，黄芪及其活性成分对动物的T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞有影响。邱世翠等探讨中药黄芪的强身健体作用，结果表明用黄芪液灌服可显著促进小白鼠脾淋巴细胞增殖和IL-2的产生。Chen等的研究，结果表明日粮中添加200 mg/kg黄芪多糖及200 mg/kg牛膝多糖，可增加脾细胞NO和IL-2的产量，增强脾细胞增生的剂量依赖性。有试验表明，黄芪多糖能影响断奶仔猪细胞免疫进而可作为一种免疫调节剂，其中获得最大日增重的添加水平为381-568 mg/kg黄芪多糖，而免疫应答的最佳水平为324-563 mg/kg黄芪多糖。宁勇等对体外培养正常成人外周血单核细胞的研究则表明，牛膝多糖能显著诱导单核细胞表达TNF-α和IL-6，增加单核细胞胞质内溶酶体量，从而激活单核细胞、增强单核细胞的吞噬作用。 　　2.抑肿瘤作用 　　多糖能抑制肿瘤引起的白细胞下降，恢复免疫系统的创伤，起到恢复肝功能、增强骨髓造血功能、抑制肿瘤生长的作用。从中药复方（人参、白术、获菩、甘草、当归等）中提取的复合多糖可显著抑制荷瘤小鼠体内H22肿瘤的生长，提高荷瘤小鼠脾指数、白细胞数，促进脾内的T， B淋巴细胞增殖，对HeLa细胞的增殖有明显抑制作用圈。龙须菜多糖、坛紫菜多糖和毛头鬼伞多糖构成的复合多糖对HeLa细胞生长具有显著抑制作用，并呈剂量依赖性，QRT-PCR检测表明，复合多糖能提高HeLa细胞中凋亡蛋白酶基因caspase-10， caspase-3表达水平，诱导细胞凋亡。通过牛膝多糖对体外培养的人胸腔巨噬细胞，内乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH）和酸性磷酸酶（Acid phosphatase，ACP）