普通高中生物课程标准（实验）选修3现代生物科技专题教材分析及教学建议幻灯片资料.pptVIP

（四）善于用流程图或概念图来总结纷繁复杂的知识 总结 1.精子和卵子的发生及其受精作用 2.体外受精和早期胚胎培养 3.胚胎工程的应用 专题4 生物技术的安全性和伦理问题 细胞类型 常用方法 受体细胞 转化过程 植物细胞 农杆菌转化法 体细胞 将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA 动物细胞 显微注射技术 受精卵 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵→受精卵→显微注射→早期胚胎培养→胚胎移植→发育成为具有新性状的动物 微生物细胞 Ca2+处理法 原核细胞 用Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 重点三:将目的基因导入受体的方法 重点四:目的基因的检测与鉴定 检测步骤 目的 方法 原理 工具 现象 1 DNA分子杂交技术 碱基互补配对 放射性同位素作标记的含目的基因的DNA片段 杂交带 2 检测目的基因是否转录出了mRNA DNA分子杂交技术 碱基互补配对 放射性同位素作标记的含目的基因的DNA片段 杂交带 3 检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗原-抗体杂交 抗体的专一性 特定抗体 杂交带(阳性反应) 检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因 1.DNA连接酶——分子缝合针 常用类型 E·coli??DNA连接酶 T4?DNA连接酶 来源 大肠杆菌 T4噬菌体 功能 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端 结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 2. 其他问题探讨： 2.怎样理解限制酶和DNA连接酶在微生物中能够分离到,而高等植物和动物中没有? 引导学生从噬菌体侵染细菌中获得灵感 3.为什么限制酶不能将自己的DNA分子剪切掉？ 1、DNA分子不具备该种限制酶的识别切割序列； 2、通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使了限制酶不能切开。 4.DNA聚合酶与DNA连接酶是同一种酶的不同名称吗? 相同 区别 DNA聚合酶 形成磷酸二酯键 只能将单个核苷酸连接到核酸片段上; 以一条DNA链为模板,形成互补的DNA链。 DNA连接酶 将两个DNA片段之是形成磷酸二脂键； 将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板。 5.标记基因的作用及其应用 标记基因 抗四环素的基因 抗氨苄青霉素的基因 特定颜色的基因 四环素 氨苄青霉素 习题:已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因,现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么?请设计实验、写出可能的实验结果，并得出相应的实验结论 对照组：不添加抗生素 实验组1：添加一定浓度的四环素 实验组2：添加一定浓度的氨苄青霉素 实验组3：添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素 对照组 实验组1 实验组2 实验组3 结 论 结果一 + + + + 既含有抗四环素基因也含有抗氨苄青霉素基因 结果二 + + — — 只含有抗四环素基因 结果三 + — + — 只含有抗氨苄青霉素基因 结果四 + — — — 既不含有抗四环素基因也不含有抗氨苄青霉素基因 载体的三大功能： 1）为外源基因提供进入受体细胞的转移能力。 2）为外源基因提供在受体细胞的的复制能力或整合力。 3）为外源基因提供在受体细胞的的扩增和表达能力。 理想载体具备四个条件： 1)具有对受体细胞的可转移性，提高导入细胞的效率。 2)具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点，使外源基因在受体细胞中稳定遗传。 3)具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点，有利于外源基因的拼接插入。 4)具有合适的选择标记（报告基因），便于DNA重组分子的检测。 问题6:为什么需要载体,直接将基因导入受体细胞行不行? 质粒的构建与改造 1)删除不必要的DNA区域，缩小分子量，提高外源DNA片段装载量。 2)灭活某些质粒的编码基因。 3)加入易于识别的选择标记基因。 4)加入特殊的基因表达调控元件。 一般来说，天然运载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的运载体进行人工改建。 （08海南高考）右图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR?为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答。 （1）将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有???????????????????????????、???????????????????????、??????????????????????????3种。若要从这