出生后早期暴露狄氏剂对小鼠纹状体突触发育的影响卫生毒理学专业论文.docxVIP

英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 BCA Bicinchoninic Acid 双金鸡宁酸法 CNS Central Nervous System 中枢神经系统 DA Dopamine 多巴胺 DAT Dopamine Transporter 多巴胺转运体 DDT Dichlorodiphenyltrichloroethane 双对氯苯基三氯乙烷 DMSO Dimethyl Sulphoxide 二甲基亚砜 EC50 Concentration For 50% Of Maximal Effect 半最大效应浓度 ECL Enhanced Chemiluminescence 化学发光增强法 EDTA Ethylenediaminetetra-Aceticacid 乙二胺四乙酸 Fig Figure 统计图 GABA γ－Aminobutyric Acid γ-氨基丁酸 GAP-43 Growth Associated Protein -43 生长相关蛋白–43 GD Gestational Day 孕…天 GFAP Glial Fibrillary Acidic Protein 胶质纤维酸性蛋白 HVA Homovanillic Acid 高香草酸 OD Optical Density 光密度 PBS Phosphatic Buffer Solution 磷酸盐缓冲盐溶液 PD Parkinsons Disease 帕金森疾病 PLL Poly-L-lysine hydrobromide 多聚赖氨酸 PND Postnatal Day… 出生后…天 PSD95 Postsynaptic Density Protein 95 突触后致密蛋白 95 P Probability 概率 r Correlation Coefficient 相关系数 SPSS Statistical Package For The Social Science 社会科学统计 Tab Table 统计表 英文缩写 英文全称 中文全称 TH Tyrosine Hydroxylase 酪氨酸羟化酶 VMAT2 Vesicular Monoamine Transporter 2 囊泡转运体 2 出生后早期暴露狄氏剂对小鼠纹状体突触发育的影响 中文摘要 目的 有机氯杀虫剂狄氏剂是持久性有机污染物，可以对中枢神经系统 产生毒性作用，尤其是多巴胺能系统，它可以改变多巴胺系统的递质水平，产生 氧化应激，引起多巴胺能神经元的凋亡或死亡。本组前期研究发现：出生后低剂 量狄氏剂暴露可以引起青春期和成年期小鼠纹状体中星形胶质细胞标志蛋白 GFAP 水平升高，提示狄氏剂具有神经发育毒性。本研究利用前期的染毒模式，观 察狄氏剂对 ICR 小鼠哺乳期、青春期和成年期纹状体突触的影响，进一步探讨其 神经发育毒性作用的特征。 方法 小鼠计划受孕，出生后每窝小鼠经调整为 10 只后，每窝随机分为 5 组，分 别为低剂量（0.2μg/kg）、中剂量（2.0μg/kg）和高剂量（20.0μg/kg）三个狄氏剂染 毒组及二甲基亚砜（DMSO）溶剂对照组和生理盐水（NS）组。于出生后第三天 （PND3）进行腹腔注射染毒，隔天 1 次，连续 6 次。期间观察小鼠的体重、全身 绒毛、开眼时间等一般生长发育指标及可能出现的体征。分别在哺乳期（PND14）、 青春期（PND36）和成年期（PND98）麻醉、灌注、剖杀、分离脑组织。左半脑 经多聚甲醛固定、梯度蔗糖溶液脱水后，冰冻切片，–40℃保存，用于 Thionin 染 色定位和免疫组织化学检测。右半脑快速分离纹状体，–80℃保存，采用 Western Blotting 检测纹状体突触蛋白水平。 结果 小鼠注射部位未出现炎性反应，实验期间各组小鼠的全身绒毛、活动等一般 生长发育指标未见异常，狄氏剂处理组在哺乳期、青春期和成年期的体重、脑重 和脑体比与溶剂对照组相比未见明显异常。出生后早期低剂量狄氏剂暴露后，对 纹状体突起生长相关蛋白–43（GAP-43）检测发现，哺乳期和青春期的狄氏剂中剂 量组和高剂量组中，均出现 GAP-43 蛋白明显下降；对多巴胺能神经元标志蛋白 （TH）检测发现，哺乳期各组中未出现明显差异，但在青春期和成年期狄氏剂染 毒组小鼠纹状体中，均出现剂量相关性蛋白水平下降；星形胶质细胞标志蛋白 （GFAP）免疫组织化学反应在青春期和成年期明显增强、阳性反应细胞分支变粗， Western Blotting 检测结果与之一致，且存在剂量效应关系；对突触标志蛋白的检 测发现，狄氏剂中、高剂量组的突触后膜标志蛋白（PSD95）水平在青春期和成年 期雌雄小鼠均明显降低，而突触前膜标志蛋白（Synapsin Ⅰ）只在青春期雄性小 鼠的中、