上皮一问质转化调控作用的试验研究.PDF

·446· ．论著． 核因子KB在缺氧微环境中对胰腺癌细胞 上皮一问质转化调控作用的实验研究 程卓鑫孙备王双佳周昊昕 贾光孔瑞王刚 姜洪池 【摘要】 目的探讨缺氧条件下核因子(NF)xB对胰腺癌细胞上皮一问质转化的调控作用。 方法在常氧和缺氧条件下培养人胰腺癌细胞株BxPC-3和Pane·l，分为常氧组和缺氧组。通过光镜 blot 观察细胞形态学变化，通过WesternMot法检测上皮标志物和问质标志物蛋白表达，通过Western 法和电泳凝胶迁移实验检测NF-IcBP65的蛋白表达和DNA结合活性，通过Transwell小室观察细胞 迁移侵袭能力，通过cellcountingkit-8法检测细胞牛存率。分别采用药物及siRNA法抑制缺氧细胞 NF．KB h后，细胞失去多边 t65表达后，重复检测上述指标。结果胰腺癌细胞在缺氧条件下培养48 形，获得纺锤形态，细胞间黏附减少并出现伪足，迁移侵袭能力增强，对吉西他滨药物敏感性下降，上 皮标志物蛋F-t表达下调，间质标志物蛋白表达上调，NF．xBP65蛋白表达和DNA结合活性升高；阻断 P65活 缺氧细胞NF．KBP|65表达后可逆转上述现象。结论缺氧可能通过上调胰腺癌细胞NF．KB 性，调控上皮．间质转化相关蛋白表达，增强其迁移侵袭能力．降低对吉西他滨的药物敏感性。 【关键词】胰腺肿瘤；缺氧；NF-KB；上皮．问质转化 ofthefunctionofnuclear to Experimental mesenchymal study factor-r．B-dependentepithelial c．al艟erceils conditions transitionin Bnder CHENGZhuo—xin．SUNBei．WANG pancreatic hypoxic Hao-xin．jlA Hong-chi of Shuang-jia，ZHOIJGuang，KONGRui，WANG‰唱，JIANGDepartment Pancreaticand First HarbinMe出cal BinarySurgery，theAffiliatedHospitalof University，Harbin150001， China Correspondingauthor：SUNBei，Email：sunbei70@tom．com To in thefunctionofnuclearfactor(NF)-KBthe to 【Abstract】Objectiveinvestigate epithelial transition in cancercells．MethodsForeuhured induced mesenchymal byhypoxiapancreatic pancreatic