江苏省徐州市高考生物总复习专题一基因工程.docVIP

PAGE PAGE 1 专题一 基因工程 第1课时 基因工程概述和基因工程工具 学习目标： 基因工程的原理及技术： 简述基因工程的原理； 说出DNA重组技术的基本工具及其作用、特点； 一、基因工程的诞生与发展 1.诞生 （1）理论支持：①艾弗里证明了DNA是遗传物质。②沃森与克里克阐明了DNA分子的双螺旋结构。③尼伦贝格等破译了遗传密码。 （2）技术支持：限制性核酸内切酶和DNA连接酶、质粒等载体和逆转录酶的发现，直接促使了基因工程的诞生。 （3）实例：1973年，美国科学家科恩等将不同来源的DNA分子进行体外重组，并首次实现了重组DNA分子在大肠杆菌中的表达，标志着定向改造生物的技术—基因工程的诞生。 2.发展1978年，人胰岛素在大肠杆菌中成功合成。1980，转基因小鼠诞生。 二、基因工程的概念 按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做重组DNA技术或转基因技术。 是一种定向改造生物的技术，其原理为基因重组，会使生物产生定向的变异。 三、基因工程的工具 1．限制性核酸内切酶“分子手术刀” （1）简称：限制酶。 （2）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。在原核生物中可以切断外来的DNA，使异源DNA的失去活力，这样便保护了细胞原有的遗传信息。限制酶不切割自身DNA的原因：原核生物钟不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 （3）特点：识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 注意：①限制酶是蛋白质类的酶，具有高效性、特异性、易变性（反应条件温和性）等酶的特性。②限制酶的作用对象是DNA，不是RNA。③限制酶识别的核苷酸序列越短，目标DNA被切割的概率越大。④限制酶识别的核苷酸序列是个回文序列（回文结构序列是一种旋转对称结构，在轴两侧序列相同而反向。其特点是在该段碱基序列互补链之间正读反读都相同）。 （4）结果：产生黏性末端或平末端 2．DNA连接酶“分子缝合针” 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。DNA连接酶连接的是两个DNA片段。 小结：几种酶的比较辨析 比较项目 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 DNA分子 DNA分子片段 脱氧核苷酸 DNA分子 作用部位 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 碱基对间的氢键 形成产物 黏性末端或平末端 形成重组DNA分子 新的DNA分子 形成单链DNA 3.载体——“分子运输车” （1）作用：①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 （2）必备条件：①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。②有多钟限制酶的切点，以便与外源基因连接。③具有特殊的标记基因，以便进行筛选。如四环素抗性基因，氨苄青霉素抗性基因等。 （3）种类：通常利用质粒作为载体，另外还有λ噬菌体的衍生物、某些动植物病毒等。一般来说，载体需根据人们的目的和需要进行人工改造。 补充：质粒的知识 一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，能够自我复制的小型环状DNA分子（细菌拟核中的DNA是大型环状DNA）。 第2课时 基因工程的基本操作程序 学习目标：简述基因工程基本操作程序，以及各步骤的一般方法、原理； 模拟重组DNA分子的操作过程 基因工程的基本操作程序： 1．目的基因的获取 （1）目的基因：编码蛋白质的结构基因。 补充：基因的结构 ①原核生物的基因（如右图所示） 原核生物基因的编码区是连续的；在非编码区的上游，有RNA聚合酶能识别开始转录的部位即启动子；在非编码区的下游有结束转录的部位即终止子。注意：启动子与起始密码，终止子与终止密码的区别。启动子在基因（DNA）上，是启动转录，而起始密码是在mRNA上，是启动翻译。终止子在基因（DNA）上，是终止转录，而终止密码是在mRNA上，是终止翻译。 ②真核生物的基因（如右图所示） 相比原核生物，真核生物的编码区是不连续的，有外显子和内含子相间排列。 注意：a.外显子：是真核细胞的基因在表达过程中能编码蛋白质的核苷酸序列。 内含子：是在转录后的加工中，从最初的转录产物中被除去的核苷酸序列（即不编码蛋白质的核苷酸序列）。b.编码区的两侧靠近非编码区的部位始终是外显子。 （2）获取目的基因的方法 ①从基因文库中获取 a.概念：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。 b.分类：基因组文库（包含有一种生物所有的基因）和部分基因文库（只包含了一种生物的一部分基因，如cDNA文库） c.从基因文库中获取目的基因方法：根据基因