特殊染色方法.PDF

特殊染色方法 Special Staining Procedures 特殊染色方法：  是用于显示组织中一些特殊组织结构或细 胞的染色方法，目的是有利于显微镜下与 其它组织的区别，更好地观察其组织结 构，了解其分布的特点，数量的变化，以 达到鉴别和研究的作用。 特殊染色方法可以分为：  单一特殊染色方法  复合特殊染色方法  固定液：不同的固定剂固定的组织，对于特殊染料会有不同的结果。  例如：普遍认为Mallory染色应选用含有重铬酸钾或氯化汞的固定液 较好，因此常用的有Zenker，Helly等。若使用其它的固定剂固定的 组织，其切片可在染色之前用含有Zenker和Helly固定剂进行再固定 （二次固定），后流水冲洗，再蒸馏水洗，即可进行正常染色。  以Zenker为例，进行二次固定的方法： Zenker固定液 95ml 冰醋酸 5ml 固定时间为：30-60分钟。 固定后进行流水冲洗，再用蒸馏水浸洗3分钟后染色。 弹性纤维染色 弹性纤维的组织学特性：  弹性纤维由弹性蛋白组成，它新鲜时呈黄色，故 又称黄纤维，弹性纤维较细，弹性较大，有时分 支相互交织成网，折光性较强，能抵抗沸水、弱 酸及碱的溶解。  在普通H.E 染色时着色浅，不易于胶原纤维区分。 因此需借助特殊的染色方法加以显示。  实验材料：选择弹性纤维较为丰富的组织，如肺、 中等动静脉、大动脉、弹性软骨 （耳廓）等。 常用的染色方法：  Weigerts Technique （1898）  Verhoeffs Technique （1908)  Nnnas orcein Technique(1891)  Gomoris aldehyde-fuchin Technique （1950) Nnna’s orcein Stain 染液的配制： ⑴地衣红 1g 70%酒精 100ml 浓HCL 1ml ⑵地衣红 0.1g 70%酒精 100ml 浓HNO3 2ml 染色步骤： 1. 组织切片二甲苯脱蜡下行至70%酒精。注意：若用 含有氯化汞成分的固定液固定的组织，切片下行过 程中要脱去组织内汞的沉淀颗粒。 2. 切片入地衣红染液染色，有两种染色方法可以选择： ①.37℃温箱 15-30分钟 ②.室温染色 17小时以上 3. 70%酒精分色，必要时可使用酸酒精 （0.5～1%）分 色。 4. 显微镜镜检，主要看弹性纤维的清晰程度，背景着 色浅。 5. 常规酒精依次脱水上行，二甲苯透明，树胶封固。 染色结果：  弹性纤维呈棕红色或棕褐色，  背景无色或淡淡的棕色。 Gomori’s aldehyde-fuchin Stain Technique  固定液：应避免选用含有重铬酸钾成分的固定剂，否则会 产生淡淡的紫色背景，宜选用Bouin 和福尔马林固定剂为 最好。  染液配制： 碱性品 （复）红