酶制剂-资源.PPT

5.实验步骤 3、实验后，用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱，放置在4℃冰箱中，几天后重复上述实验，看是否有相同效果。 为什么要放置在4℃的冰箱里？ （四）实验 时间 初配时 保存2天后 对照组颜色反应 流出液稀释前颜色反应 流出液用水稀释1倍后颜色反应 最初流出液颜色反应 6.实验结果记录 （四）实验 固定化酶在催化反应中以固相状态作用于底物，一般是使底物溶液通过固定化酶的柱，柱流出液即成为酶催化的产物；有时也将固定化酶悬浮于底物溶液中，一定时间后溶液即成为酶催化的产物。不管是固相柱还是悬浮固相酶，回收后在一定条件下贮存，还可再利用。 * 石英砂：上有许多小孔，将淀粉酶吸附。 * 吸附法：将酶吸附在固体表面上。包埋法：图示将酶包埋在细微网格里。//石英砂：很强的吸附能力。//、皂土、硅藻土、高岭土、多孔玻璃、硅胶，二氧化钛等；有机载体如面筋、淀粉、纤维素、胶原、塞璐璐和火棉胶等） * 交联法：将酶相互连接起来。 * 图示固定化酶的反应柱。//滤布//除去未吸附的游离淀粉酶 。 * 图示固定化酶的反应柱。 * * 用具未介绍 * 控制滴管流速：0.3ml/min的流速，即滴管流出量为每分钟6滴。6=0.3mL/50μL。除去未吸附的游离淀粉酶 ，并检测固定化酶柱中的流出液中是否还有淀粉酶存在，通过这个过程，可使学生更好地理解酶的固定化。当实验结束后，对固定化酶柱要进行洗涤并冷藏，过一段时间，应该让学生重做实验，以测定固定化酶的有效性。 * 任何装置反应的前段是不稳定的。可能前面刚加入淀粉溶液，在石英砂之间有空气，孔隙比较大，溶液下来比较快，没有充分反应。//蒸馏水，会被稀释。 * 都稀释 * 第二部分酶的应用 实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 酶制剂 1.优点 固定化酶 实验 2.缺点 1.概念 2.优点 3.酶的固定化方法 4. 固定化后酶性质的变化 思考题 1、酶制剂的概念和种类 （一）酶制剂 含有酶的制品 ①定义： 多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶 ②种类： A、液体酶制剂 治疗某些胃病的胃蛋白酶液 B、固体酶制剂 2、酶的生产 ①提取法 定义：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来 优点： 简单易行，在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值 实例：在屠宰厂，可以从家畜胰脏中提取出胰酶；在水果加工厂，可以从菠萝皮中提取出菠萝蛋白酶 缺点： 要有充足的原材料，广泛应用受到限制 ②发酵法——常用方法 定义：通过微生物发酵获得所需要的酶。 如果是胞外酶，可以从发酵液中直接提取；如果是细胞内酶，则可将细胞弄碎再经过提取纯化而得到。 易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。 优点： 提取方式： ②溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本，不利于工业化使用。 ①酶在水溶液中很不稳定，通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活。 ③反应后酶会混在产物中，可能会影响产品质量。(难分离） （一）酶制剂 4、酶制剂的缺点 3、酶制剂的优点 用量少、催化效率高、低能耗、低污染等。 1、固定化酶: 2、固定化酶技术的优点： （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）可以被反复利用。 （二）固定化酶 将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在不溶于水的载体（即介质）上，使之不溶于水而又有酶的活性。 吸附法、 交联法、 包埋法、 共价偶联法等 3、酶的固定化方法： （二）固定化酶 酶的固定化方法 1、吸附法： 通过载体表面和酶分子表面间的次级键（氢键、疏水键等）相互作用而将酶吸附到固体吸附剂表面的方法。固体吸附剂多为活性炭、多孔玻璃、石英砂等。 2、包埋法： 将酶包埋在高分子半透膜或高分子凝胶细微网格中中。分微囊型、网格型两种。（聚丙烯酰胺凝胶包埋最常用） 酶的固定化方法 3、共价偶联法： 酶的功能基团和固相支持物表面上的反应基团之间形成共价键，从而将酶固定在支持物上。 4、交联法： 不使用载体，利用双功能或多功能试剂在酶分子间进行交联反应，把酶分子彼此交叉连接起来，形成网络结构。（利用共价键） (1) 固定化对酶活性的影响： ①操作稳定性提高； (2) 固定化对酶稳定性的影响：提高 ②贮存稳定性比游离酶大多数提高； ③对热稳定性，大多数升高，有些反而降低； ④对变性剂的耐受力升高。 （二）固定化酶 酶活性下降，反应速度下降。 4、固定化后酶性质的变化： （三）固定化酶的应用实例 ——固定化酶技术生产高果糖浆 葡萄糖 果糖 反应柱 固定化酶 分布着小孔的筛板 固定化酶反应柱 （葡萄糖异构酶） 1.如何制备固定化酶？ 将酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内。柱子