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纤维素酶活力测定的方法的研究进展 　　摘要纤维素酶是一类能够水解纤维素的β-1，4-葡萄糖苷键生成葡萄糖的多组分酶的总称，传统上将其分为3类：内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。纤维素酶是一种复合酶，准确测定纤维素酶活力的大小，对于研究纤维素酶的特性及应用具有重要意义。该文对纤维素酶测定的常用方法进行了综述和评价。指出单一的酶活力测定方法不能确切的反映该酶的作用机制和活力，只有诸活力的综合测定方能全面的反映酶制剂对纤维素的作用。 　　关键词纤维素酶；活力测定；内切葡聚糖酶；外切葡聚糖酶；β-葡萄糖苷酶 　　中图分类号O636.1+1文献标识码A文章编号 1007-5739（2010）24-0032-03 　　 　　ResearchProgressonMethodforDeterminationofCellulaseActivity 　　CHI Ya-qin 1HUANG Kui 2 　　（1 College of Conservation Biology，Southwest Forestry University，Kunming Yunnan 650224； 2 Jointown Pharmaceutical Group Limited liability Company） 　　AbstractCellulase is a general reference of enzymes that hydrolyzes β-1，4-glycosidic linkages in cellulase into glucose. Traditionally，it has been divided into three categories：endo-glucanase，exo-glucanase or cellobiohydrolase，and β-glucosidase. Cellulase is a complex enzyme composed of several components.It is important to accurately detect the activity of cellulase for study this enzyme.In this paper，the common method of determination of cellulose were reviewed and evaluated. The single method to determine enzyme activity cannot accurately reflect the function mechanism and activity of this enzyme. Only a comprehensive determination of all activity can fully reflec the role of enzymes on cellulose. 　　Key wordscellulase；determination of activity；endo-glucanase；exo-glucanase；β-glucosidase 　　 　　纤维素属于一种线形葡聚糖天然高分子化合物，由葡萄糖分子通过β-1，4-糖苷键连接而成，基本重复单位是纤维二糖，残基间由β-1，4糖苷键连接，而纤维二糖由两分子β-D-吡喃型葡萄糖以β-1，4糖苷键连接形成，是地球上最丰富的生物聚合物[1-2]。在纤维素之间存在着氢键，通过氢键的缔合作用，纤维素链形成了纤维素束。在这个纤维素的连续结构中，分子密度大的地方，成平行排列，定向良好，形成纤维素的结晶区。随着致密度的变小，结合程度变弱，分子间空隙变大，定向变差，形成了纤维素的无定型区。在纤维素中，除了纤维素链之间存在氢键外，在分子内也存在有氢键。氢键是一种高能键，这种键的存在给纤维素水解带来很大的困难[3]。 　　纤维素酶（cellulase）是指能水解纤维素β-1，4-葡萄糖苷键，使纤维素变成葡萄糖的一组酶的总称，它不是单一酶，而是起协同作用的多组分酶系，包括内切葡聚糖酶（EG或CX）、外切葡聚糖酶（CBH，EC或C1）和β-葡萄糖苷酶（CB，纤维二糖酶）[4-5]。由于各种纤维性材料中结晶区、无定形区所占比例不同以及其他物理性质的影响，完全降解时所需要的上述3类纤维素酶的比例也各异。同理，以各种纤维材料为底物测试同一种纤维素酶系并以还原糖的产生作标准时，得到的活力值也不同，这是测定纤维素酶活力时遇到的主要难题之一。所以在测定时，国内外研究者通常通过测定在一定时间内纤维素酶解的平均速率来表示纤维素酶的活力。纤维素酶酶活定义采用国际酶学委员会规定的国