EPO的杂质检测方法培训教材.pptVIP

* 确定最大有效稀释倍数(MVD) 最大有效稀释倍数是指在试验中供试品溶液被允许稀释的最大倍数，在不超过此稀释倍数的浓度下进行内毒素限值的检测。用以下公式来确定MVD: MVD=cL/λ 式中L为供试品的细菌内毒素限值; c为供试品溶液的浓度，如供试为注射用无菌粉末或原料药，则MVD取1,计算供试品的最小有效稀释浓度c=λ/L; λ为在凝胶法中鲎试剂的标示灵敏度(EU/ml)。 * 鲎试剂灵敏度复核试验 根据鲎试剂灵敏度的标示值（λ）将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟，然后制成2λ、λ、0.5λ和0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒。取分装有0. 1ml鲎试剂溶液的10* 75mm试管或复溶后的0. 1ml/支规格的鲎试剂原安瓶18支，其中16管分别加入0.1ml 不同浓度的内毒素标准溶液， 每一个内毒素浓度平行做4管; 另外2管加0.1ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照。将试管中溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入37℃士1℃的恒温器 中，保温60分钟士2分钟。 * * 将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180度若管内形成凝胶，且不变形、不从管壁滑脱者为阳性;