辣椒化感的作用优势组分评价及GCMS鉴定.docVIP

辣椒化感的作用优势组分评价及GCMS鉴定 　　摘要：应用隶属函数值法，分析评价了3种方法收集到的辣椒化感物质经3种不同洗脱剂的浓缩提取液对辣椒种子萌发的化感作用，确定了化感优势组分，并对优势组分进行了GC-MS鉴定。结果表明，连作6a的辣椒种植地的土壤溶液经土壤原位收集法收集，并用甲醇洗脱所得的提取液（A2B3-6）为化感作用的优势组分，其化感隶属函数值为0.150。A2B3-6组分的GC-MS检测试验共检测到烷烃、芳香烃、醇、烯酸酯、芳香酸酯和含N化合物等多种物质，其中邻苯二甲酸二异丁酯的相对质量分数最大（47.67％）、匹配度（86％）较高，其可能对辣椒的连作障碍起着重要作用。 　　关键词：辣椒；化感作用；化感物质 　　 　　目前，全世界有2/3的国家种植和食用辣椒（CapsicumfrutescensL.），但辣椒栽培存在着严重的连作障碍现象，有报道指出重茬减产可达70％[1]。侯永侠等[2]研究表明，连作障碍的原因之一是辣椒的化感效应，辣椒根系分泌物对其自身有抑制作用，在根系分泌物的作用下，辣椒根系表现出逆境胁迫反应。李春龙等[3]研究表明，辣椒叶具有很强的自毒作用，根次之，茎最弱。然而关于辣椒化感作用（Allelopathy）与辣椒化感物质的报道却很少。 　　本文运用模糊数学中的隶属函数值的方法，对连续收集法[4]、植株水浸提法、土壤原位收集法[5]3种方法收集到的辣椒化感作用物质的不同有机溶剂洗脱组分的化感作用指标进行了量化，指标包括辣椒种子的发芽率、种子发芽指数[6，7]、胚轴长、胚根长、幼苗鲜质量、幼苗干质量，并据此进行综合评价，确定了辣椒化感作用的优势组分，并对该化感优势组分进行GC-MS鉴定，以期为鉴定辣椒的化感作用物质提供科学的参考依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　试验选用贵州著名的朝天椒品种遵椒一号的种子为试材，种子为2006年采收，由遵义县辣椒产业化办公室提供。 　　1.2试验方法 　　2007年3~11月，分别采用疏水性根渗出液连续收集法、植株水浸提法、土壤原位收集法收集辣椒的化感物质。将各方法收集到的溶液过XAD-4吸附树脂柱（植株水浸提法收集到的溶液先经滤纸过滤），再分别用乙醚、乙酸乙酯、甲醇洗脱，用旋转蒸发器将各洗脱液浓缩至干，然后分别用10mL甲醇溶解，取1mL溶解液于垫有双层滤纸的直径9cm的培养皿中，待甲醇挥发后加入2mL蒸馏水，再在滤纸上均匀地摆放50粒辣椒种子，于25℃恒温箱中进行发芽试验。对照中先加入1mL甲醇，挥发后再加蒸馏水。每处理重复3次。每天向各培养皿中加入1mL蒸馏水以保持滤纸湿润。 　　从种子开始发芽起，每天记载发芽数，14d后计算发芽率、发芽指数，测量胚轴长、胚根长、鲜苗质量、干苗质量，分析3种方法收集到的辣椒化感物质对辣椒种子萌发的化感效应。种子发芽标准为其胚根长达种子长的一半。苗鲜质量的测定以3棵苗为1个重复。 　　利用隶属函数值确定各收集法中各洗脱剂的化感优势组分。用模糊数学中的隶属函数值的方法计算化感隶属函数值X（ij），公式为： 　　X（ij）=（Xij－Xjmin）/（Xjmax－Xjmin） 　　式中X（ij）表示i种类j指标的化感隶属值；Xij表示i种类j指标的测定值；Xjmax、Xjmin为指标的最大值和最小值。 　　以各处理辣椒种子萌发参数的综合隶属函数值来确定刺激辣椒种子萌发的优势组分，并用GC-MS分析鉴定该组分中的化学物质。GC-MS测定条件为：色谱柱为Agilent19091s-433（30m×250μm×0.25μm）；进样口温度为250℃，检测器温度为230℃；柱温采用程序升温（初温80℃，维持 　　1min；每1min升30℃至200℃，维持0min；然后每1min升6℃至250℃，维持5min；每1min升30℃至270℃，维持5min，以确保所有的化合物已经流出）；载气为氦气，载气流速为0.8mL/min；进样方式为分流（5∶1）进样；吹扫开始时间为0.75min；进样量为1μL。 　　1.3试验设计 　　如表1所示，A1、A2、A3分别代表连续收集法、土壤原位收集法、植株水浸提法3种收集方法，B1、B2、B3分别代表乙醚、乙酸乙酯、甲醇3种洗脱剂。土壤原位收集法分别对连作2，4，6a的辣椒种植地的土壤溶液进行了收集，分别用A2-2、A2-4、A2-6表示。连续收集法设未栽植辣椒植株的连续收集系统作为空白对照，依不同洗脱组分计为CKA1B1、CKA1B2、CKA1B3。发芽试验再设蒸馏水处理为对照。 　　2结果与分析 　　2.1辣椒化感优势组分分析 　　因为单一指标不能全面反映辣椒化感物质作用效应的大小，所以利用综合隶属函数值反映辣椒的化感效应。综合隶属函数值是将某一处理