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辣椒黄绿苗不育系叶片光合色素变化及酶活性的研究
辣椒黄绿苗不育系叶片光合色素变化及酶活性的研究
摘要:研究了辣椒(Capsicum oaznum L.)黄绿苗胞质雄性不育系(YBM-A6)、保持系(YBM-B6)及绿苗(96―140)的叶绿素变化及叶片酶活性。从幼苗期到成株期三者的叶绿素含量呈逐步增加的变化趋势,绿苗叶片叶绿素、类胡萝卜含量都远高于黄绿苗,但黄绿苗叶片叶绿素a/b、类胡萝卜素/叶绿素(a+b)(除结果期外)的比值都远大于绿苗。黄绿苗叶片中游离脯氨酸含量均高于绿苗,但其含量变化趋势相同;黄绿苗叶片中过氧化物酶、过氧化氢酶活性变化趋势与绿苗相同;YBM-A6叶片过氧化氢酶活性均低于其保持系YBM-B6,过氧化物酶活性则高于其保持系,超氧化物歧化酶活性在开花结果盛期明显高于保持系YBM-B6和96-140。说明叶绿素和类胡萝卜素含量和变化与辣椒黄绿苗的叶色变化有关,酶活性变化可能与黄绿苗胞质雄性不育系YBM-A6的不育有关。
关键词:辣椒;黄绿苗;胞质雄性不育系:叶绿素:酶
形态标记中植物叶色突变体早在20世纪30年代就已发现。植物叶片呈色相当复杂,它与叶片细胞内色素的种类、含量以及在叶片中的分布有关。大田作物中在水稻、大豆、大麦、小麦、棉花17等多种植物上发现。目前,叶色突变体已广泛应用于基础研究和生产实践中。相对于大田作物,蔬菜叶色突变体的研究还较为落后,仅在甜瓜、西瓜㈣、黄瓜、番茄、辣椒、花椰菜、胡萝卜、小白菜等蔬菜上有相关报道。
叶色突变体在育种上具有重要的应用价值,以其可见、简单直观的外部特征,在作物种质资源鉴定及育种材料的选择上发挥了重要作用。在育种工作中,叶色变异可作为标记性状,简化良种繁育和杂交种生产;某些叶色突变体具有特殊的优良性状,为作物遗传育种提供了优异种质资源,对辣椒黄绿苗与H97643自交分离世代中胞质雄性不育株98―1A、98―3A不育源进行杂交、自交、回交等工作,已基本实现了辣椒黄绿叶标记性状与雄性不育系的有机结合,该突变体具有较强的耐弱光和抗高温等优良特性,为辣椒在雄性不育、创造优异种质资源,选育优良品种、光合系统结构与功能及其调控机制、杂种纯度快速鉴定等方面的研究提供了有效手段。
本研究通过对辣椒黄绿苗胞质雄性不育系(cMS)及其保持系、牛角辣椒(绿苗)的叶绿体色素含量,叶片游离脯氨酸含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxi-dase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性变化进行比较分析,为探明色素与叶色变化及叶片酶活性变化对胞质雄性不育利用的影响,探讨辣椒黄绿苗胞质雄性不育机理及品种选育与利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1供试材料
供试材料为江苏省镇江市蔬菜研究所提供。96-140:野生牛角辣椒,叶色为绿色。YBM-A6:以不育源H97643自交分离世代中胞质雄性不育株98-1A、98-3A为不育源,经与辣椒黄绿苗YBM-B6杂交分离,多代回交转育而成,属于无花粉雄性不育类型,不育性稳定,不育株率100%。YBM-B6:为从牛角辣椒96-140中发现的辣椒黄绿苗突变体。发芽期子叶及真叶全部为嫩黄色;幼苗期(苗期)真叶黄色,老叶为黄绿色:开花结果期下部叶片绿色,中部叶片黄绿色,上部新生叶片黄绿色(偏黄),除叶色黄绿外,其他性状与96-140相同(见彩版插页第37页)。YBM-B6为不育系YBM-A6的保持系。
1.2试验方法
试验于2009年12月至2010年6月在江苏省镇江市蔬菜研究所大棚内进行。采用电热温床穴盘直播育苗,当幼苗6叶1心时定植于大棚,常规栽培管理。在A.幼苗期(3片叶)、B.苗期(7片叶)、C.开花结果初期(26片叶)、D.开花结果盛期测定辣椒黄绿苗不育系YBM-A6和保持系YBM-B6及牛角辣椒96-140叶片叶绿体色素含量。幼苗期、苗期、开花结果初期、开花结果盛期选取顶部刚刚完全展开的叶片进行测定,试验设3次重复,测定结果取3次重复平均值。96-140辣椒选取叶片部位同辣椒黄绿苗,方法同上。
叶绿素(叶绿素a,Chlorophyll a:叶绿素b,Chlorophyll b)、类胡萝卜素(Carotenoid)含量测定参照沈伟其的方法;脯氨酸含量采用水浴浸提法测定:SOD活性采用氮蓝四唑法测定:POD活性采用愈创木酚连续测定法测定;CAT活性参照邹琦的方法测定。测定值以mean+SD表示,采用Excel和GraphPadPrism 5.0软件进行数据分析,组间比较采用多样本均数Two-way ANOVA检验,P0.05表示差异有统计学意义,P0.01表示有显著性差异,P0.001表示有极显著性差异。
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