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不同花色荷花色素成分及稳定性剖析 　　摘要：为分析荷花花色形成机理，以不同类型的14个荷花品种花瓣为材料，进行花色表型测定、花色素成分分析及花色苷稳定性鉴定。结果表明：荷花花色素的主要成分为类黄酮物质，包括黄酮、黄酮醇、二氢黄酮醇等，不含类胡萝卜素；红莲型和粉莲型荷花花色素含有花色苷类物质；复色莲型荷花含有微量的花色苷类物质，可能分布在花瓣尖部。花色苷稳定性试验显示，温度不超过50 ℃，花色苷含量不随温度升高而降低，而低pH值有利于荷花花色苷的稳定。本研究为阐明荷花花色形成的机理、利用基因工程培育新花色品种等提供了理论基础。 　　关键词：荷花；花色素；类黄酮；花色苷；稳定性 　　中图分类号： TS201.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）02-0331-04 　　收稿日期：2015-03-19 　　基金项目：江苏省农业科技自主创新资金[编号：CX（13）3018]；江苏省林业三新工程（编号：lysx[2013]35）。 　　作者简介：徐君（1982―），男，江苏苏州人，硕士研究生，主要研究地方特色资源收集与评价工作。E-mail：flyforever007@163.com。 　　通信作者：姜红卫。E-mail：sacjhw@163.com。植物花色是由内外多种因子协同作用的结果，但在本质上是由某些特定色素在花瓣细胞中特定表达决定的。色素的种类、含量、结构、组合及分布最终决定了花色的变化[1]。自然界中，植物花色素包含了类胡萝卜素、类黄酮和生物碱3大类[2]，现阶段对不同花色的花色素机理研究主要集中于类胡萝卜素和类黄酮[3～5]。类胡萝卜素包括胡萝卜素和叶黄素，赋予植物花瓣黄色或橙色[6]。类黄酮可分为黄酮、黄酮醇、黄烷酮、异黄酮、黄烷醇及花色苷等6类[7]，其中黄酮、黄酮醇的颜色表达从象牙白色至浅黄色，而花色苷则控制着花瓣的红色、紫色和蓝色[8]。 　　荷花（Nelumbo nucifera）为睡莲科莲属多年生草本水生花卉，其花色花型多样，王其超在《中国荷花志》中按照Wnschers花卉色谱描述，将荷花分为红莲型、粉莲型、黄莲型、白莲型、复色莲型等5类[9]。对于植物中类黄酮及花色素苷的生物合成途径虽已有详细研究[10]，但荷花花色的形成是一个复杂的过程，在不同气候、不同发育时期甚至于同一植株不同花，花瓣颜色都可能存在差异，因此研究荷花花瓣色素的生化机理对于研究花色具有重要意义。目前对荷花花色形成机理研究并不多，仅对类黄酮化合物的含量及分析有一些报道：徐双双等从药理学角度，采用加速溶剂萃取-高效液相色谱法联用技术分析了7个荷花品种花瓣样品中5种类黄酮化合物的具体含量[10]；邓娇等采用高压液相色谱-二极管阵列光谱检测/电喷雾离子化质谱（HPLC-DAD/ESI-MS）串联技术分析了108个荷花材料的花瓣中类黄酮的成分及含量，结果显示红色与花青素含量密切相关，而黄色与黄酮及黄酮醇的含量相关[11]。本研究以搜集的不同类型的14个荷花品种为材料，通过对花色表型测定、色素定性分析的研究，同时探讨不同生理条件下荷花花色苷的稳定性，有助于全面、有效地探索荷花花色形成、表达的生化机理，为利用基因工程技术开展荷花花色相关基因的分离与功能分析研究，进而调控改变花色、培育新花色品种、提高荷花观赏品质提供重要技术支撑。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　试供材料于2014年5―9月陆续收集自苏州市农业科学院观赏荷花资源圃，共14个品种（系），其中黄莲型3个、白莲型2个、粉莲型4个、红莲型2个和复色莲型3个。具体品种、花特征及种源见表1。 　　1.2试验方法 　　1.2.1荷花花色测定方法在荷花盛开状态下，每个品种随机选3个单株。取花瓣中心部，用色差仪（NF333型，C/2°光源）测定CIE L*a*b* 表色系统下的明度L*值、色相a*值和b*值，计算各品种平均值，并使用SPSS绘制三维散点图观察不同荷花品种花瓣色分布。 　　1.2.2材料采集与处理将上述花瓣材料采摘后装入牛皮纸信封中，在 60 ℃下烘干24 h至恒质量。用研钵研成粉末，按品种分装入自封袋密闭后在常温下保存，备用[13]。 　　1.2.3不同花色型荷花品种花色素提取及初步定性方法称取荷花花瓣粉末0.1 g左右，每个品种3份，分别放入具塞试管，每个品种3个试管中分别加入石油醚、10%盐酸、30%氨水各5 mL，观察试管中颜色的变化，并进行记录[1]。 　　1.2.4不同花色型荷花品种类黄酮显色反应方法精确称取各荷花品种花瓣粉末0.1 g，放入具塞试管中，加入15 mL 1%的盐酸甲醇溶液，黑暗条件下提取24 h，用定性滤纸过滤后，定容至 25 mL。分别取 2 mL提取液，进行以下4类9项显色反应[14-15]：（1）还