乌江上游毕节段溶洞地下水浮游硅藻及水质剖析.docVIP

乌江上游毕节段溶洞地下水浮游硅藻及水质剖析 　　摘要：对乌江上游毕节段层台镇玉龙村溶洞的3个采样点进行野外水样采集，利用硅藻细胞密度、多样性指数、均匀度指数及硅藻商等指标评价溶洞地下水水质现状。结果表明，溶洞地下水中共发现硅藻18 属107 种（含变种），平均细胞密度为1.59×104个/L，硅藻群落结构为物种较丰富、细胞密度较低、多样性较高。洞口1、洞口3共有的硅藻种类较多，可能是洞口1、洞口3的水环境特征相似，洞口2水环境可能受人为干扰影响。溶洞地下水质为贫营养状态，水体清洁。 　　关键词：浮游硅藻；优势种；物种多样性；溶洞 　　中图分类号： Q178.1文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）02-0323-03 　　收稿日期：2014-10-14 　　基金项目：国家自然科学基金（编号30560011）；贵州省科技基金（编号：黔科合外G字[2012]7023）；贵州省科技厅科技支撑计划（编号：黔科合SY字[2012]3178）。 　　作者简介：孙丹（1988―），女，吉林松原人，硕士研究生，主要从事湿地生态学研究。E-mail：719479994@。 　　通信作者：支崇远，博士，教授，从事硅藻生理生态学研究。E-mail：zhicyy@。喀斯特溶洞是由溶蚀作用形成的，洞中的水有溶蚀、侵蚀作用[1]。溶洞地下水与河流、湖泊等地表水有一定的区别。硅藻分布非常广泛，在淡水、半咸水、海水、陆地上都能生存。硅藻是一种低等的单细胞藻类植物，个体微小，体长一般在1～200 μm。硅藻种类多、生命周期短、繁殖快、属种丰富，对环境因子变化十分敏感，国内外已将硅藻作为水质监测的重要指标[2-6]。关于应用硅藻对溶洞地下水质进行分析的研究很少[7-8]。本研究以贵州省毕节市七星关区层台镇玉龙村溶洞地下水为对象，分析溶洞地下水中浮游硅藻群落的组成及分布，旨在为浮游硅藻种群多样性研究提供理论基础。1材料与方法 　　1.1采样地点 　　玉龙洞位于乌江上游毕节段层台镇玉龙村，分布于整个村。依据玉龙洞在乌江上游毕节段的特点，依次在洞口1（位于村头）、洞口2（位于农户住宅旁）、洞口3（位于山上）（图1）3个采样点采集样品。洞口均较小，洞口的水流速度比较快，洞口1、洞口3周边植物繁茂，洞口2附近有人居住。洞壁潮湿，洞内温度较洞外低。 　　1.2样品的处理 　　在洞口1、洞口2、洞口3采样点分别取自然状态水1 000 mL。 　　1.2.1钙质、泥沙处理加入一定量浓度为12 mol/L的盐酸溶液，利用乙醇灯对试验器皿持续加热至不产生气泡为止。 　　1.2.2有机质、其他藻类处理加入一定量的浓硫酸溶液，加热至不起泡为止。 　　1.2.3样品提取向样品中注入蒸馏水，自然冷却；待硅藻沉积在容器底部，使用真空水泵吸除烧杯上清液；多次重复此操作，至溶液最终pH值为7左右。 　　1.2.4样品存放根据样品硅藻密度，将硅藻溶液定容至50 mL备用。 　　1.2.5标本制作从制得的硅藻样品中提取500 μL样本置于18 mm×18 mm盖玻片上，使用ZCY胶将样本制成硅藻永久制片，干燥。 　　1.3硅藻鉴定与统计 　　使用50iBas尼康生物相差光学显微镜（DIC）对溶洞中的硅藻进行鉴定，统计硅藻的壳面数量。 结合国际权威硅藻图谱、《中国淡水藻类》及《中国淡水藻志》第4卷、第10卷、第12卷鉴定硅藻属种[9-13]。分别计算硅藻的物种数以及每物种个体数，每个样品计数3片，各片之间数值差距小于等于15%，如果误差大于15%，则相应增加计数片数，取其平均值。 　　1.4方法 　　硅藻细胞密度（N）计算公式如下： 　　N=n×V1/V2×V3。（1） 　　式中：V1为浓缩样体积（mL），V2为计数体积（mL），V3为采样体积（mL），n为个体数[14]。 　　Berger-Parker 物种优势度指数（I） 计算公式如下： 　　I=ni/N。（2） 　　式中：I为物种的优势度，N为样品的个体总数，ni为第i种物种的个体数。当优势度I≥0.1时，该物种即为优势属或优势种。 　　硅藻生物多样性指数（H）计算公式如下： 　　H=-∑（ni/N）×ln（ni/N）。（3） 　　式中：n为样点第i种硅藻个体数，N为样点中的硅藻总个体数[15-16]。H3代表清洁水质，2H≤3代表轻度污染水质，1H≤2代表中度污染水质，0H≤1代表重度污染水质。 　　D=（S-1）/lnN。（4） 　　式中：D代表Margalef 多样性指数，S代表硅藻种类数，N代表硅藻个体总数。D6代表清洁水，4≤D≤6代表水质轻度污染，3≤D4代表水质中度污染，D3代表水质重度污染。 　　E=H/log2S。（5）