甾体药物化学的新进展_甾体转化酶及其抑制剂的研究近况.docVIP

甾体药物化学的新 进展 1 综述与专论 甾体药物化学的新进展 　　——甾体转化酶及其抑制剂的研究近况 谭载友　廖清江 ( 广东药学院药物研究所　广州　510224) 摘　要　在分子水平研究的 基础上讨论了 3 -氧-5-烯甾体异构酶与 芳构化酶的活性 部位及作 用机制, 并介绍了甾体转化酶抑制剂的开发和甾体芳构化酶抑制剂的研究进展。 关键词　甾体转化酶　甾体转化酶抑制 剂　芳构化酶　甾体芳构化酶抑制剂 　　当人们研究和认识了疾病的生化变化因 酸组成。 果关系以后, 便以酶为研究对象来研制新药。 应用氘标记底物的方法证明, 某些甾体 已有很多药物是和酶相互作用后起效的: 通 异构化反应的主要途径是 4-氢通过二烯醇 过抑制或促进酶的活性, 恢复被紊乱了的调 分子内转变为 6 位置, 此质子的转移是通 节机制或受到干扰的正常生化变化过程。 过异构酶来实现的。 近代生命科学的发展已经阐明了一些酶 1. 2　活性部位的定位 的三维结构; 分子生物学研究亦揭示了大量 当竞争性抑制剂 , -不饱和甾体酮( I) 酶促反应的过程和细节, 从而提供了新药作 存 在时, 光( 300nm) 可使酶不可逆失活。 用的靶向。并据此设计出新的酶抑制剂。 已经证明这种失活反应发生在酶的活性位 下面分述甾体转化酶的研究进展以及与 [ 1] 。为了 分 辨光 反 应位 置, H earne 和 置 甾体相关的酶抑制剂的研究开发现状。 [ 2] 通过睾酮和半胱氨酸配对, 以乙二 Benisek 1　甾体转化酶 胺作隔间, 连接 O-( 羟甲基) 琼脂糖颗粒, 制 1. 1　3-氧-5 烯甾体异构酶 备成固态光亲和剂( Ⅱ) 。将异构酶放入光试 剂小柱, 应用光辐射产生酶-试剂复合体。不 和共价键结合的酶可以从柱中洗脱。根据二 。这种酶能结 酰-甾体酯键的低碱性水解的数据, 证明了天 晶, 催化反应很容易进行, 不需要辅助因子, 冬氨酸 38 是共价配置点和活性部位。 因此它对甾体化学、酶甾体反应机制和动力 用碱基机制抑制剂( Ⅲ) 可辅助分辨出活 学的研究非常有利。 性部位的另一种氨基酸。它可以和天冬氨酰 这种异构酶具有可分辨的直径小的亚 57 的酰胺基反应, 形成一种不稳定的烯式复 基, 分子量 13. 394K D 。它具有两个均相动力 合体结构, 酶正是通过这种方式固定化, 从而 学甾体键合区域, 每一个前体由 125 个氨基 使甾体发生异构反应 [ 3] 。 [ 3] 。 中国药科大 学　南京　210009 　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　药　学　进　展　　　　　　　　　1998 年　22 卷　 第 1 期 2 　　Po llack 等 [ 4] 制备并评价了 3和 3-环 [ 4] 制备并评价了 3和 3-环 也是通过天冬氨酸 38 与酶键合的。这一结果 氧基甾体( Ⅳ) 和( Ⅴ) 作为直接作用活性部位 唯一的解释为17-环氧基甾体是以可逆键合 的抑制剂。Ⅳ是异构酶可逆抑制剂, 而Ⅴ是不 模式与酶反应的[ 7] 。Bevins 等[ 8] 应用扫描紫 可逆抑制剂。已证实两种甾体化合物是以 - 外吸收光谱, 证明( Ⅵ) 可以两种不同的方式 面与酶的天冬氨酸 38 结合 [ 5] 。 [ 5] 。 与酶键合。这说明活性部位似乎并无严格的 17-环氧基甾体马萘雌酮衍生物( Ⅵ) 是 甾体化学要求。 另一种直接和活性部位作用的抑制剂[ 6] 。它 1. 3　分子模型研究 论是顺磁甾体和普通底物是不同的, 可以肯 顺磁标记雄( 甾) 烷( Ⅶ) 是另一个有效的 定这种酶适应不同的甾体。模型实验表明, 酪 异构酶竞争性抑制剂。Kuliopulos 等[ 9] 用顺 氨酸 55 酚基可能供给质子或氢, 键合到甾体 磁( ESR) 、核磁共振( NM R) 检测结合分辨率 的 3 -氧代基上。酪氨酸 14 紧靠结合的甾体, 为 2. 5 的X-射线结构测定和计算机图形学 方位不固定。 建立其酶的活性中心模型, 此研究得到的结 要注意的是用这个模型考察突变酶时, 甾体药物化学的新 进展 3 可能会出现不正确的分析数据 [ 10] 。当用苯基 [ 10] 。当用苯基 基团, 它对还原酶的亲和力提高了将近 10 丙氨酸取代酪氨酸 55 时, 这种酶和原型酶活 倍 [ 12] , 现已用于普通高胆固醇患者。而具有 [ 12] , 现已用于普通高胆固醇患者。而具有 性差别较小, 而用天冬酰胺取代天冬氨酸 38 更大侧链的化合物( IX) 是裂解胆固醇侧链 得到的酶就比原型酶的转化速率低 10 5. 6 。用 5. 6 。用 酶—— 细胞色素 P -450s cc 的抑制剂。 苯丙氨酸取代酪氨酸 14 后的酶的折叠速率 2　甾体转化酶抑制剂 比原型酶低 104