氯霉素酶联免疫分析方法的建立.docVIP

第 18 卷 第 4 期 同 　位 　素 Vol. 18 　No. 4 2005 年 11 月 Nov. 2005 Journal of Isotopes 氯霉素酶联免疫分析方法的建立 林 　斯 1 ,韩世泉 ,刘一兵 ,许文革 ,官国英 (中国原子能科学研究院 同位素研究所 ,北京 　102413) 摘要 : 以兔抗氯霉素多抗为包被抗体 ,氯霉素(CA P) 辣根过氧化物酶连接物为标记物 ,四甲基联苯胺( TMB) 为显色底物 ,建立了氯霉素直接竞争酶联免疫分析(CA P2EIA) 方法 。本方法灵敏度为 0. 046μg / L ,批内变 异系数 10 % ,批间变异系数 24 % ,回收率 62 %～145 %。用牛奶样品预处理所得上清液为稀释液做得稀 释实验 ,相关方程为 y = 3. 988 x - 0. 234 , 相关系数为 0. 999。标准曲线范围为 0. 1～10μg / L 。 关键词 : 氯霉素(CA P) ; 酶联免疫分析( EIA) ; 辣根过氧化物酶( HRP) ; 建立 中图分类号 : R446. 61 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 100027512 (2005) 0420211205 Esta bl ishment of an Enzyme L inked Immun oa ssa y for Chl ora mphen icol L IN Si , HAN Shi2quan , L IU Yi2bing , XU We n2ge , GUAN Guo2ying ( Department of Isotope , China Institute of A tomic Energy , Bei jing 102413 , China) Abstract : A sensitive and specific EIA for chloramphenicol (CA P) is established by using one anti2CAP polyclonal antibody. The antibody is coated on the microtiter plate. The la2 belled co mpo und is horseradish peroxidase ( HRP) conjugate of chloramphenicol. TMB2 H2 O2 solution is used as the substrate of HRP. The sensitivity of the assay is 0. 046μg/ L . The int ra2 and inter2CV s of 10 samples are lower than 10 % and 24 % , respectively. The an2 alytical recovery is 62 %～145 %. The correlative equation is y = 3. 988 x - 0. 234 , r = 0. 999 , using milk supernatant as buffer. The analytical range is 0. 1～10μg/ L . Ke y wor ds :chloramphenicol ( CA P) ; enzyme immunoassay ( EIA ) ; horseradish peroxidase ( HRP) ; establishment 　　氯霉素对人的造血和消化系统具有严重的 物链传递给人类并产生过敏反应。为了规范动 毒副作用 ,有可能引发再生障碍性贫血 ;对于少 物性食品中抗生素的残留量 ,质检部门需要一种 数人还会引起视神经炎 、皮疹等不良反应 [1 ] 。因 [1 ] 。因 快速、简便、准确的检测方法。目前常用的检测 此国内外都规定动物性食品中氯霉素残留量为 氯霉素的方法有液相色谱法、放射免疫分析法、 不得检出。氯霉素主要用作农牧产品饲料添加 酶联免疫分析法 [ 2 ,3 ] 。其中酶联免疫分析法灵 剂以降低畜类的患病率 ,由于代谢缓慢容易沿食 敏度较高、特异性强、快速、经济 ,且无放射性污 收稿日期 : 2005201207 ; 修回日期 : 2005204224 作者简介 : 林斯(1979～) ,男(汉族) ,福州人 ,硕士 ,核技术应用专业 ? 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 212 同 　位 　素 　　　　　　　　　　　　　　　　　第 18 卷 　 染并已在许多领域中得到广