抗生素发酵工艺全解.pptx

种子带菌的检查可从菌种室保藏的菌种、斜面、摇瓶直到种子罐。 培养基带菌原因如蒸汽压力或灭菌时间不够，培养基配料未混合均匀，存在结块现象，设备未清洗干净，特别是罐冲洗不到的死角处，有结痂而未铲除干净。 设备方面特别是老设备带菌，原因主要是夹层或盘管、轴封和管道渗漏、空气除菌效果差，管道安装不合理，存在死角等。 * 二、染菌的判断 镜检或无菌试验 状态参数（溶氧变化规律） 发酵液观察 * 三、防止和处理染菌的方法 防止染菌的关键是加强技术管理、细化各种预防措施、并做到日常化、制度化、规范化。 （一）重视日常工作 ①检查空气冷却器、空气夹套加热器、分预过滤器的运行情况。 ②空气除菌过滤器定期灭菌。 ③观察总蒸汽温度和压力是否对应，保证蒸汽为饱和蒸汽。 ④定期拆检连消塔、维持罐，检查内件坚固情况，及时清理内垢。检查喷淋冷却管路及无聊管路上相关阀门的泄露情况。 * ⑤强化菌种保藏管理，严格执行无菌室管理制度。 ⑥认真做好罐的清理、冲洗工作，清除死角。 ⑦定期进行碱水煮罐。 ⑧根据培养基情况选择正确的灭菌形式。 ⑨严格按标准操作规程进行灭菌操作，合理控制灭菌指标在规定范围，避免超标。 ⑩对发酵辅助设备仪表进行定期保养和检修。 * （二）异常情况处理 （1）对染菌罐放罐后的处理 对各阀门打压试漏并拆检相关设备 （2）种子培养期染菌的处理 种子灭菌弃之并对种子罐及管道进行检查灭菌 （3）发酵早期染菌处理 适当改变生长参数，使有利于生产菌而不利于杂菌的生长；依情况而定，重新进行灭菌，再接种。 （4）发酵中后期染菌处理 加入抗生素或杀菌剂 * （5）噬菌体污染的防止及处理 ①并罐法 ②轮换使用菌种或使用抗性菌株 ③放罐重消 ④罐内灭噬菌体法 * 第八章 几种重要微生物药物的发酵工艺 一、青霉素的发酵工艺 青霉素是抗菌素的一种，是指从青霉素培养液中提制的分子中含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素，是第一种能够治疗人类疾病的抗生素。青霉素类抗生素是β-内酰胺类中一大类抗生素的总称。 * 理化性质 溶解性 吸湿性 稳定性 聚合反应 过敏反应 降解反应 抗菌活性 * 1、溶解性 青霉素是一种有机酸，易溶于醇、酸、醚、酯类，在水中的溶解度很小，且会迅速丧失其抗菌能力。青霉素的金属盐极易溶于水，几乎不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂。 2、吸湿性 结晶的内在质量、晶形和品种均影响吸湿性。青霉素钠盐、胺盐、钾盐的吸湿性依次减小。由于钠盐比钾盐更不易保存，要求包装严密，以免吸湿变质。 * ③ 连续式发酵优缺点 优点：产率、生产质量、生产能力、生产稳定性、设备利用率和易于实现自动化方面比分批式发酵优越；还可以不断收获产物，提高菌体密度。 缺点：杂菌污染机会增多，细胞易发生变异和退化。 * 适用范围 生产能力大，微生物变异小，酶活稳定，产品需连续处理的工业体系，仅限用于纯培养要求不高的情况。 * 第二节 发酵条件的影响及其工艺控制 常规发酵条件：罐温、搅拌转速、搅拌功率、空气流量、罐压、液位、补料、加糖、油或前体等的设定和控制。 能表征过程性质状态的参数：PH值、溶氧、溶解CO2、氧化还原电位、尾气O2和CO2含量、基质或产物浓度、代谢中间体或前体浓度、菌体浓度 * 一、温度的影响和控制 1、温度对发酵的影响 ①温度影响微生物发酵化学反应速度 ②温度影响发酵液的物理性质 ③温度改变产物合成方向、稳定性 ④温度选择还应参考其他发酵条件，灵活掌握 * 2、温度的控制 工业生产上，大发酵罐在发酵过程中一般不需加热，因发酵过程释放了大量发酵热，需冷却的情况较多。 * * 二、PH值的影响和控制 1、PH值对发酵的影响 ①PH值影响细胞内各种酶的催化活力产生影响。 ②PH值影响膜电位和细胞跨膜运输 ③PH值变化导致发酵产物稳定性变化，影响其积累 ④PH值影响细胞表面电荷，关系到细胞结团或絮凝 * 2、PH值的控制 发酵过程中的PH值可通过直接补加生理酸性物质或生理碱性物质和补料的方式来控制。 补料方法可以实现补充营养、延长发酵周期、调节PH值和培养液的特性。 * 三、溶氧的影响和控制 1、溶氧的影响 ①溶氧直接影响菌体生长 ②溶氧对产物形成的影响是多样性的 * 2、溶氧的控制 发酵的溶氧浓度是由供氧