免疫组织化学技术2010学习资料.pptVIP

染色结果判断 标准： -阳性颗粒分布于胞质内、膜上或核内，细胞边界和核结构清晰 -细胞间抗原含量不同，染色强度应有区别,如相同，可能是非特异性染色 *边缘效应：在石蜡切片的组织周围常见有深染区，向中心区逐渐变淡，称边缘效应。为非特异染色，也可在刀痕、折叠及坏死与受挤压的部位出现 * * * 对照实验 阳性对照： -用已知抗原为阳性的标本与待检测标本同时进行染色 阴性对照： -与上述相反 -不加一抗 * 组织细胞的标本制备 原则：尽可能多地保存抗原和尽可能多地保存组织与细胞的形态学 * 常用固定剂 4%多聚甲醛缓冲液 -配法：取多聚甲醛40g，溶于0.1mol/L pH7.4 PBS 500ml, 搅拌均匀，加热至60 ℃ ，滴加1N NaOH至溶液清澈，补PBS至1000ml, 4 ℃保存。 -应用：光镜免疫组化 -时间：温和，可长期保存组织 * 抗体的标记 标记物的种类： /荧光素*（免疫荧光组织化学技术） /酶*（酶标抗体法,免疫酶组织化学技术） /生物素*（亲合免疫组织化学技术） /铁蛋白/胶体金*（免疫金银标记技术） /葡萄球菌A蛋白 /放射性核素 * 免疫荧光组织化学技术 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体)，形成的抗原抗体复合物带有荧光素，在荧光显微镜下，由于