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枸杞多糖提取条件优化及体外抗氧化活性研究-农学论文 枸杞多糖提取条件优化及体外抗氧化活性研究 汪 琢1，赵佳莹1，廖 林1，陆俊霖1，杨玉红2 （1．沈阳工学院生命工程学院，辽宁 抚顺 113122；2．沈阳农业大学生物科学技术学院，沈阳 110866） 摘要：为了优化枸杞（Lycium chinense）中多糖的提 收稿日期：2014－12－16 基金项目：辽宁省大学生创新训练项目；辽宁省高等学校科学研究一般项目（L2014565） 作者简介：汪 琢（1984－），女，辽宁沈阳人，讲师，硕士，主要从事植物活性小分子的有效成分及其活性研究，（电话 （电子信箱）wangzhuo＿[emailprotected]．com；通信作者，杨玉红（1973－），女，辽宁庄河人，教授，博士，主要从事微生物工程方面的研究， （电话电子信?a class=“__cf_email__” href=“/cdn-cgi/l/email-protection” data-cfemail=“0ce8afa5383c3d3d3b393c3a3c4c7d7d”[emailprotected]．com。 枸杞（Lycium chinense）为茄科（Solanaceae）植物，是落叶小灌木，可食用及药用的成熟果实被称为枸杞或枸杞子。枸杞在全国各地均有野生，以宁夏、河北、甘肃及云南等地较多。宁夏产的皮薄肉厚，色泽艳红，质量优良，久负盛名。枸杞是我国传统的出口食品之一，远销港澳、东南亚、西欧及北美等地区和国家。枸杞的开发应用，主要在于对枸杞子中枸杞多糖的开发，枸杞多糖是枸杞中主要有效成分之一，是从枸杞中提取而得的一种水溶性多糖。它是一种非特异性免疫增强剂，具有增强免疫力、抗癌、抗氧化、防衰老、增加造血功能、防止遗传损伤等作用［1－5］。目前已确定该多糖系蛋白多糖，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖等6种单糖成分组成。经研究表明，枸杞多糖是枸杞子调节免疫、延缓衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用［6－10］。所以枸杞多糖的开发无论在医药行业还是在食品行业都显得尤为重要［11］。枸杞多糖可作为第三代功能性食品的功能因子，有很好的开发前景。目前对枸杞多糖的研究主要集中在枸杞多糖的结构、药理作用等方面，对枸杞多糖的生产工艺报道却很少。本试验对影响枸杞多糖的提取因素进行了较为系统的研究，优化了提取条件，旨在为其工业化生产或其相关产品的开发提供依据。 1 材料与方法 1．1 材料与设备 新鲜枸杞采集于辽宁省抚顺市枸杞种植基地，干燥粉碎后阴凉处保存。乙醇、氢氧化钠、浓硫酸、苯酚、石油醚等均为分析纯。721G型可见光分光光度计：上海精密科学仪器有限公司；TDL－40B型低速台式大容量离心机：上海安亭科学仪器厂；JD100－3 型电子天平：沈阳龙腾电子有限公司；SHZ－D（Ⅲ） 型循环水式真空泵：巩义市予华仪器有限责任公司；RE－52A型旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器厂；GFL－70型电热鼓风干燥箱：天津市莱玻特瑞仪器设备有限公司；HH－6型数显恒温水浴锅：国华电器有限公司；FW－100型高速万能粉碎机：天津市泰斯特仪器有限公司；MM720KG1－PW型微波炉：广东美的厨房电器制造有限公司。 1．2 试验方法 1．2．1 工艺路线 枸杞→烘干粉碎→脱脂除蛋白 →浸提→离心→取上清液减压浓缩→乙醇沉淀→ 离心→取沉淀干燥测干重→复溶→定容→测多糖提取率。 1．2．2 多糖含量的测定方法 1）质量比法。把烘干得到的枸杞粗多糖精确称量，再根据样品重量，按照下式计算出多糖提取率。 提取率＝m/M×100％ 式中，m－枸杞粗多糖质量（g）；M－样品总质量（g）。 2）硫酸－苯酚法。把烘干得到的枸杞粗多糖加去离子水溶解，再转入容量瓶中定容，以葡萄糖为标准品绘制标准曲线，将定容后的枸杞多糖溶液、苯酚溶液、浓H2SO4依次按比例加入，静置10 min后振荡，冷却后在波长490 nm下测吸光度，根据标准曲线，按照下式计算出多糖提取率。 提取率＝P·V·F/m×100％ 式中，P－供试溶液中葡萄糖的浓度（mg/mL）；V－供试溶液的总体积（mL）；m－样品总质量（g）；F－换算因子。 1．2．3 单因素试验 称取枸杞样品5份，每份均为10 g，考察料液比（g∶mL，下同）分别为1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35；浸提温度分别为60、70、80、90、100 ℃；浸提时间分别为1、2、3、4、5 h；浸提pH分别为5、7、9、11、13；浸提次数分别为1、2、3、4；加3