岛津制备色谱仪标准操作规程.docVIP

岛津制备色谱仪标准操作规程- 4.1.1打开仪器各部分电源开关 依次打开仪器的A泵（LC-20AP）、B泵（LC-20AP）（若需要使用C泵 作为白动进样泵时，需同时打开C泵电源，否则不打开），检测器（SPD-20A） 和控制器（CBM-20A）电源。 4.1.2打开工作站软件 开启电脑，进入windows界1J*，左键双击棠iij上的LCsolution T作站 图标 LabSolutions T作站图标 HPCNG1455D7-instrumentl Ready状态 4.1.3检査流动相和废液情况 流动相不得少于10L，废液不得超过3/4桶高。 4.1.4仪器检查 左键点击软件右上角的泉控制（instrument on/off）图标，使该图标不 陷，），左键选择通道Instrumentl （或者（或者选择），当听到两次滴的一 声并且界谢左上角显示绿色的，表示仪器软件可以正常工作。观察各泵 是否正常运行，检查管线、接口是否有漏液现象；检查仪器压力是否正常， 正常值应在3-10MPa之间，压力波动不得超过±0.5MPa。压力值不得超过 lOMPa,否则应予以停泵，检查管线、色谱柱是否有堵塞现象，在线过滤 器是否需要清洗或更换；压力值不得低于0.5MPa，否则检查柱塞杆密封 是否漏液，Purge阀是否有打开未关。 4.2方法设置 4.2.1梯度程序表设置 点出工作站界面下半部分的Normal按钮图标，选择LCTime Prog. ，出现时间程序表，其屮Time列表示时间，Module是仪器模块，Action 是对应的时间/模块需要执行的动作，Value是设置的具体数值。 下面的截图表示40-65的梯度程序表： 1 该程序表示：0.01分钟时，泉的总流速达到80ml/min，其中B泉(有 机相)的比例为40; 0.40分钟时，检测器基线调零；25分钟时，B泵比例 达到65%； 35分钟时，B泵比例达到75%； 45分钟时，B泵比例达到85%； 60分钟时，系统停止运行。 4.2.2其它参数设置 点击Simple Settings按钮，界面如下: Simple Settings中与LC Time Prog界面中的相同项目需保持一致。 其中LC StopTime表示工作站停止数据采集的时间，EndTime表示方 法停止运行的时间，Mode选择二元梯度(Binary gradient)模式，Total Flow 表示总流速80mL/min, Pump B Cone.表示起始梯度40%, C泵流速为0, Wavelength表示检测波长，一般通用为Chi为220nm, Ch2为254nm。如 化合物的紫外吸收较弱，应根裾化合物的紫外情况设定检测波长Chi。检 测器在自动收集时，以Chi下化合物出峰的峰高为是否满足收集条件的判 定依据。 4.3色谱柱平衡 方法编辑完成后，对色谱柱进行平衡。点击右下角Download方法， 用方法中的起始流动相浓度平衡色谱柱，在80ml/min的流速下平衡5min 即可。 4.4进样 2 4.4.1单针进样(手动进样) 首先左键点击菜单栏中单针进样图标(Single Run)，会出现一个对话 框，界面如下： 需要填写完整信息:Sample Name、Sample ID，方法路径(Method File)： D:\methods\wuhan-prep HPLC method(80mL).lcm,数据保存路径(Data File)： D:\Data\Date\Name-Sample ID-Sample Weight-Conditions-Number (D:\Data\201406\ ZHP-EW156-220-Pl-3g-Basic-ACN-4.lcd)o 然后在手动进样器转至 Download状态时，通过专用进样注射器将样品注射进去，迅速将手动进样 器转至inject状态完成进样，鼠标左键点击确定(0K),触发分离方法运行。 4.4.2Batch进样(C泵自动进样) 首先打开Batch表格，出现以下界妞： 填写表格完整信息，如上图(Vial#: -1、Sample Name： EW159-208、 Sample ID： EW159-208、 Method File： D:\methods\Auto-wuhan-prep HPLC method(80mL).lcm、Data File： D:\Data\Date\Name-Sample ID-Sample weight-Conditions), 通过总体积和单针进样体积确 3 定进样针数，最后增加一个停机方法（D:\methods\OFF.Icm），确保Batch 在运行完毕之后，仪器能够自动停机。 4.5组分收集 4.3.1手动收集 在仪器运行过程中，需要手动