《云芝多糖的提取》-毕业论文.docVIP

学校：浙江农林大学 学院：林业与生物技术学院 班级： 生物技术111班 姓名： 云芝多糖的提取 摘要：云芝多糖的提取主要采用水提法，利用醇析将多糖分离出来，然后再将其进行脱色处理，最后得到无色结晶糖。通过紫外光普可测得多糖的化学结构中含有的官能团。 关键词：云芝、云芝多糖、水提法、醇析、萃取、蒽酮、脱色处理、紫外光普、红外光谱 一．云芝简介： 【英文名称：】Coriolus versicolor polysaccharide 云芝（Coriolus versicolor ）又称彩绒革盖菌、杂色云芝、彩绒菌、瓦菌。隶属担子菌亚门，层菌纲，非褶菌目（多孔菌目），多孔菌科、栓菌属。 化学成分：云芝含丰富的蛋白质、脂肪、多糖、多糖肽、葡聚糖、木质素、氨基酸和多种无机盐等物质以及蛋白酶、过氧化酶、淀粉酶、虫漆酶以及革酶等多种酶。 生境分布:常见大型真菌，主要是野生,生于多种阔叶树木桩、倒木和枝上。云芝分布于我国黑龙江、吉林、辽宁、河北、河南、山东、山西、河南、河北、陕西、青海、甘肃、新疆、西藏、广东、广西、贵州、江西、江苏、台湾、浙江、福建、安徽、四川、内蒙古等地区。 世界各地森林中均有分布。 药理作用：该菌主要为药用，有去湿化痰效果，可治疗肺病和慢性支气管炎、迁延性或慢性肝炎，还可作为肝癌患者的免疫治疗药物。云芝多糖是云芝提取物中的主要活性成份： 分子量在1.3×10 6 以上，它是含有β—糖苷键的葡聚糖，并测出是β（1→3）和β（1→6）糖苷键，云芝提取物的主要活性成分是云芝多糖。云芝多糖从云芝菌丝体和发酵液中提取的多糖均具有极强烈的抑制癌细胞活性。 云芝多糖的提取方法： 本实验采用溶剂提取法——水提醇沉法。水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法 多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水醇等极性强的溶剂 用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取 ，也可以用冷水浸提渗滤 ，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇 ，使其最终体积分数达到 左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置 ，多糖的质量分数和得率均较高。 影响多糖提取率的因素有：水的用量提取温度浸提固液比提取时间以及提取次数等 溶剂提取法中还有酸提法酸提法， 为了提高多糖的提取率，在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法， 如某些含葡萄糖醛酸等。目前多糖的提取方法还有生物提取法和强化提取法。 二、实验部分 实验目的：提取芝中的多糖 提取方法：水提醇沉法 实验试剂：蒸馏水、蒽酮、氯仿、正丁醇、95%的乙醇、浓硫酸、二已氨基已基纤维素 实验原料：云芝肝泰 实验仪器：250ml烧杯、100ml烧杯、玻璃棒、分液漏斗、移液管、试管、电加热套、循环水真空泵、表面皿、托盘天平、广口瓶、量筒、吸滤纸、滴定管、铁架台、50ml的容量瓶、洗耳球、紫外光谱仪器、红外仪器、压片机 具体步骤： 1、标准曲线的绘制 X 浓度C g/L 0.0000 0.0100 0.0200 0.0300 0.0400 0.0500 0.0600 Y 吸光度A 0.0000 0.0550 0.1200 0.1650 0.2260 0.2780 0.3390 2、糖的提取、分离、去蛋白、醇析 用托盘天平取云芝（本实验用云芝肝泰代替）10g溶解于适量的蒸馏水中，可用电加热套加热至80度加速其溶解。然后平均分成三分进行萃取，萃取液为氯仿：正丁醇（4：1）共100ml。然后将分液漏斗中的上层液体收集起来，加入到装有体积为收集的糖液体体积4倍的无水乙醇中，进行醇沉。静置一个星期的时间，因为多糖在乙醇中的溶解度小，所以通过醇沉可以将多糖提取出来。 3、紫外光普-----比色法 0.1g蒽酮溶解于100ml的浓硫酸中 0.1019g云芝肝泰溶解于100ml水中 用移液管准确移取0.2ml糖溶液加蒸馏水至2ml 再加6ml的蒽酮溶液 放入一个试管中，沸水浴保温15分钟 测在波长大概在625nm处的吸光度 吸光度 = 1.57 波长 = 622.222 计算得出糖的浓度为0.27534 g/L 4多糖的脱色--------过柱子 所用的试剂 所用仪器 三、表证 红外光谱 四、结论 经过脱色后得到的是无色晶体糖 五、参考文献 1.《河 南 科 学》第27卷 第12期 2009年12月 2.季宇彬. 《中药多糖的化学与药理》. 北京: 人民卫生出版社. 2005.5 3.朱小霞，罗学刚多糖提取与纯化技术应用进展［J］食品研究与开发，2007 ，28(3):186-188 4.《中国药理学通报》2001年 第6期