大豆CPEPSPS基因的PCR扩增.doc

PAGE 本科生毕业论文 抗草甘膦转基因大豆(Glycine max)巢式PCR检测方法的建立与应用 Methodological Research on Detection of Genetically Modified Soybean Resistant to Glyphosate based on Nested PCR 学生姓名 卢 福 林 所在专业 生 物 技 术 所在班级 生技1021 申请学位 理学士 指导教师 胡汉桥 职称 副教授 副指导教师 职称 答辩时间 2006年 6 月 9 日 目 录 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc136872163 摘 要 PAGEREF _Toc136872163 \h I HYPERLINK \l _Toc136872164 abstract PAGEREF _Toc136872164 \h II HYPERLINK \l _Toc136872165 1 前言 PAGEREF _Toc136872165 \h 1 HYPERLINK \l _Toc136872166 2 实验一　大豆叶片基因组DNA的提取 PAGEREF _Toc136872166 \h 3 HYPERLINK \l _Toc136872167 2.1 实验材料 PAGEREF _Toc136872167 \h 3 HYPERLINK \l _Toc136872168 2.2 仪器设备 PAGEREF _Toc136872168 \h 3 HYPERLINK \l _Toc136872169 2.3 所用试剂 PAGEREF _Toc136872169 \h 4 HYPERLINK \l _Toc136872182 2.4 CTAB法大豆叶片DNA的提取 PAGEREF _Toc136872182 \h 4 HYPERLINK \l _Toc136872192 2.5 DNA质量的检测 PAGEREF _Toc136872192 \h 5 HYPERLINK \l _Toc136872198 2.6 结果与分析 PAGEREF _Toc136872198 \h 6 HYPERLINK \l _Toc136872199 3 实验二 大豆CP4-EPSPS外源基因的巢式PCR扩增 PAGEREF _Toc136872199 \h 6 HYPERLINK \l _Toc136872200 3.1 实验材料 PAGEREF _Toc136872200 \h 6 HYPERLINK \l _Toc136872201 3.2 实验仪器 PAGEREF _Toc136872201 \h 7 HYPERLINK \l _Toc136872202 3.3 大豆CP4-EPSPS基因的PCR扩增 PAGEREF _Toc136872202 \h 7 HYPERLINK \l _Toc136872207 3.4 结果与分析 PAGEREF _Toc136872207 \h 8 HYPERLINK \l _Toc136872208 4 讨论 PAGEREF _Toc136872208 \h 13 HYPERLINK \l _Toc136872209 5 结论 PAGEREF _Toc136872209 \h 16 HYPERLINK \l _Toc136872210 鸣 谢 PAGEREF _Toc136872210 \h 17 HYPERLINK \l _Toc136872211 参考文献 PAGEREF _Toc136872211 \h 错误！未定义书签。 摘 要 PAGE II 摘 要 从美国国家生物信息中心(NCBI)下载CP4-EPSPS基因的核苷酸序列，用DNAMAN软件设计出扩增CP4-EPSPS基因的外引物和内引物。利用改良的CTAB法分离纯化转基因和非转基因大豆DNA，用巢式PCR的方法对转基因和非转基因大豆DNA进行了PCR扩增。结果表明，用巢式PCR从转基因植物中扩增出了预期大小的片段，回收该片段测序。经BLAST分析和序列比较证明了该片段为CP4－EPSPS基因的一部分。通过本实验建立用PCR方法检测抗除草剂转基因大豆的方法。 关键词：草甘膦；转基因大豆；PCR ABSTRACT abstract The sequence of CP4-EPSPS gene was downloaded from the National centre for biotechnology information(NCBI)， The outside and