酶提取及分离纯化.ppt

第六章 酶的提取和分离纯化 定义：酶的提取是指在一定的条件下，用适当的溶剂或溶液处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂或溶液中的过程。也称为酶的抽提。 原则：酶提取时首先应根据酶的结构和溶解性质，选择适当的溶剂。一般说来，极性物质易溶于极性溶剂中，非极性物质易溶于非极性的有机溶剂中，酸性物质易溶于碱性溶剂中，碱性物质易溶于酸性溶剂中。 酶都能溶解于水，通常可用水或稀酸、稀碱、稀盐溶液等进行提取，有些酶与脂质结合或含有较多的非极性基团，则可用有机溶剂提取。 提高温度，降低溶液粘度、增加扩散面积、缩短扩散距离，增大浓度差等都有利于提高酶分子的扩散速度，从而增大提取效果。 为了提高酶的提取率并防止酶的变性失活，在提取过程中还要注意控制好温度、pH值等提取条件。 ■ 酸溶液提取 有些酶在酸性条件下溶解度较大，且稳定性较好，易用酸溶液提取。 注意事项： pH值不能过低，以免使酶变性失活。 ■ 碱溶液提取 有些酶在碱性条件下溶解度较大，且稳定性较好，应采用碱溶液提取。 注意事项： pH值不能过高，以免使酶变性失活。 ■ 有机溶液提取 有些酶与脂质物质结合牢固，或含有较多的非极性集团，可以采用与水可以混溶的乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂提取。 注意事项： pH值不能过低，以免使酶变性失活。 影响酶提取的主要因素 ☆温度 在适当的范围内，提高温度可以加快