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第十二章 蛋白质的生物合成 Protein Biosynthesis,Translation 翻译是蛋白质生物合成的同义词 翻译的过程就是将核酸中由4种碱基序列组成的遗传信息,通过遗传密码破译的方式转变成为蛋白质中的20种氨基酸排列顺序。 第一节 蛋白质生物合成体系 参与蛋白质生物合成的物质包括: 20种氨基酸(AA)作为原料 酶及众多蛋白因子,如IF、eIF ATP、GTP、无机离子 一、翻译模板mRNA及遗传密码 * mRNA是遗传信息的携带者 遗传密码表 从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 1、连续性(Commaless) 移码突变(框移突变) 2、简并性(Degeneracy) 遗传密码中,除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外,其余氨基酸有2、3、4个或多至6个三联体为其编码。这称为遗传密码的简并性。 编码同一氨基酸的几组简并密码子上第一二位 碱基多相同,而第三位碱基改变往往不影响氨基酸翻译。 3、摆动性(Wobble) 密码子与反密码子配对,有时会出现不遵从碱基配对规律的情况,称为遗传密码的摆动现象。 密码子、反密码子配对的摆动现象 4、通用性(Universal) 从病毒直到人类,细胞核DNA指导的蛋白质合成都使用同一套遗传密码。 二、核蛋白体是肽链合成的装置 (1)P位:即肽位(peptidyl site),或给位,在延长成肽之后,3′端连接肽链的肽酰tRNA占据的位置,肽链转位至此,延长继续。 (2)A位:即氨基酰位(aminoacyl site),或称受位,每次延长,氨基酰tRNA就加入到A位上,延长成肽中,此位因接受肽酰基链,故名受位。 (3)E位:排出位(exit site) 核蛋白体的组成 三、tRNA与氨基酸的活化 tRNA的三级结构示意图 (一)氨基酰-tRNA合成酶 tRNA分子的反密码环与mRNA上的密码配对。 tRNA的3’-末端-CCA-OH是氨基酸的结合位点。 由密码 — 反密码 - 氨基酸之间的“对号入座”,保证了从核酸到蛋白质信息传递的准确性。 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法: Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet (二)氨基酰tRNA的表示方法 氨基酰-tRNA书写规则:aa-tRNAaa;Arg-tRNAArg; 原核生物:起始密码(AUG、GUG、UUG) —— 编码N-甲酰甲硫氨酸 fMet、tRNAfMet, fMet-tRNAfMet; 真核生物:起始密码(AUG) —— 编码甲硫氨酸 Met、Met-tRNAiMet; 翻译过程:密码(AUG) —— 编码甲硫氨酸 Met、Met-tRNAeMet。 第二节 蛋白质生物合成过程 翻译的起始 翻译的延伸 翻译的终止 一、肽链合成起始 甲硫氨酰tRNA与mRNA结合到核蛋白体上,生成 翻译起始复合物 (translational initiation complex) 起始因子IF 和 eIF (一)原核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离; mRNA在小亚基定位结合; 起始氨基酰-tRNA的结合; 核蛋白体大亚基结合。 1、核蛋白体亚基分离 起始因子 IF3 结合到核糖体 (70S) 的小亚基上,使大亚基 (50S) 与小亚基 (30S) 解离; 大小亚基解离 核糖体70S + IF3 + IF1 30S小亚基.IF3.IF1 + 50S大亚基 (促解离)(促IF3作用) — 利于小亚基与mRNA,fMet-tRNAfMet结合。 2、mRNA在小亚基定位结合 (1)原核生物mRNA通过5’端S-D序列配对结合到核蛋白体小亚基上的16S-rRNA近3’-末端处(有一段短序列…UCCU…)。IF-3对此有固定作用。 (2)紧接S-D序列的小段核苷酸,又可以被核蛋白体小亚基蛋白(rps-l)辨认结合。 S-D序列:在翻译起始密码子AUG
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