雌激素治疗骨质疏松症机制研究-内科学(内分泌和代谢病)专业论文.docxVIP

华中科技大学博士学位论文 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 PAGE 10 PAGE 10 英汉缩略语名词对照 英文缩写 ALP 英 文 全 称 alkaline phosphatase 中 文 名 称 碱性磷酸酶 E2 ER estradiol estrogen receptor 雌二醇 雌激素受体 IGF Insulin-like growth factor 胰岛素样生长因子 IGF-BP Bind IGF 结合蛋白 IL-1 interleukin－1 白介素－1 IL-6 interleukin－6 白介素－6 IL-11 interleukin－11 白介素－11 NF-κB nuclear factor-kappa-gene binding κ 基因结合核因子 OB osteoblast 成骨细胞 OC osteoclast 破骨细胞 OD optical density 吸光度 OP osteoporosis 骨质疏松症 OPG osteoprotegerin 护骨素 PI phosphatidylinositol 磷脂酰肌醇 PMO postmenopausal osteoporosis 绝经后骨质疏松症 PTH parathyroid hormone 甲状旁腺激素 PTHrP parathyroid hormone-related peptide 甲状旁腺激素相关肽 RANK Receptor activeator of NF-κB 受体活化因子 NF-κB RANKL RANK ligand RANK 配基 sIL-6R soluble IL-6 receptor 可溶性 IL－6 受体 TNF-α tumor necrosis factor α 肿瘤坏死因子－α 中文摘要  雌激素治疗骨质疏松症机制研究 第一部分 雌激素对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响 目的：探讨雌激素在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响。 方法：体外分离培养大鼠成骨细胞（osteoblasts, OB），取传一代细胞，予以 10-8mol/l 雌二醇（estradiol, E2）培养 72 小时，设空白对照组。应用碱性磷酸酶 （alkaline phosphatase, ALP）染色法鉴定成骨细胞，然后测定 ALP 活性并检测成 骨细胞的增殖能力。用茜素红法对成骨细胞行矿化结节染色，低倍光学显微镜下 测量矿化结节面积并计算面积比，观察 E2 对矿化能力的影响。 结果：和对照组相比 E2 组 OB 增殖能力显著提高（p0.01），ALP 活性显著升 高（p0.01），矿化面积及矿化面积比显著增加（p0.01）。 结论：E2 在体外促进大鼠成骨细胞生长和增殖，提高 ALP 活性，并促进骨矿 化物质在骨内沉积。 关键词： 雌二醇；成骨细胞；增殖；矿化 第二部分 17β-雌二醇对骨肉瘤 MG63 细胞株中 IL-6、IL-11 和 NF-κB 表达的影响 目的：研究 17β-雌二醇（17β-E2）对人骨肉瘤 MG63 细胞株 IL-6﹑IL-11 及 NF-κB 的表达的影响。 方法：运用细胞培养技术培养人骨肉瘤 MG63 细胞 24 小时，然后分别给予 10-10mol/L﹑10-8mol/L 、10-6mol/L 的 17β-E2 干预 24 小时后提取细胞 mRNA 和蛋 白质，其中 10-8mol/L 17β-E2 培养组分别在培养 0 小时、3 小时、6 小时、12 小时、 24 小时时提取细胞 mRNA 和蛋白质。运用 RT-PCR 技术检测 IL-6﹑IL-11mRNA， 运用 Western Blot 检测 IL-6 及 NF-κB 蛋白质，观察不同浓度 17β-E2 及同一浓度雌 激素作用不同时间对人骨肉瘤 MG63 细胞株 IL-6﹑IL-11 及 NF-κB 的表达的影响。 结果：（1）10-10mol/L 17β-E2 组 IL-6mRNA 及蛋白质的表达下降，但无显著性 差异，随浓度增加 MG63 细胞株 IL-6mRNA 及蛋白质的表达继续下降，并有显著 性意义；（2）17β-E2 可下调 MG63 细胞株 IL-11mRNA 的表达,随浓度增加，时间 延长，表达下调越明显；（3）17β-E2 可下调 MG63 细胞株 NF-κB 蛋白质的表达， 并较 IL－6、IL－11 要早，呈浓度和时间依赖性。 结论：雌激素可抑制成骨细胞 NF-κB 的合成，下调成骨细胞 IL-6﹑IL-11 的 表达，可能从多个作用部位减弱破骨细胞的作用，从而抑制骨吸收，以治疗骨质 疏松症，是妇女绝经后骨质疏松症运用雌激素替代治疗的理论依据之一。 关键词：17β-雌二醇；骨肉瘤 MG63 细胞株；IL-6；IL-