分子生物学演示文稿.pptVIP

第二章 染色体与DNA 主要内容： 染色体 DNA的结构 DNA的复制 原核生物和真核生物DNA复制的特点 DNA的修复 DNA的转座 二、真核细胞与原核生细胞染色体 （一）真核细胞染色体 真核细胞染色体：染色体存在于细胞核内，是极细微的线性构造，控制生命遗传，有“生命之线”之称。一般在细胞有丝分裂过程中才能被观察到，平时以较细且松散的染色质形式存在于细胞核中。 除性细胞外，真核生物体细胞染色体都是二倍体，在二倍体阶段，每个基因都有两个拷贝，其中的一个拷贝会通过配子（性细胞）从亲本传到子代，精、卵细胞结合形成合子（受精卵） 作为遗传物质，染色体具有特征： 分子结构相对稳定 能够自我复制，使亲子代之间保持连续性 能够指导蛋白质的合成，从而控制整个生命过程 能够产生可遗传的变异。 1、蛋白质 除大约与DNA等量的组蛋白外，还含有大量非组蛋白。非组蛋白占总组蛋白总量的60%-70%，种类很多，约20-100种。非组蛋白包含酶类，收缩蛋白、骨架蛋白、核孔蛋白等 2、基因组DNA 特点：含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。 重要概念： C值：一种生物单倍体基因组DNA的总量 （C值一般随生物进化而增加，高等生物C值＞低等生物） C值谬误：C值往往与种系进化的复杂程度不一致，某些低等生物却具有很大的C值。 3、染色质与核小体 （二）原核细胞染色体 第二节 DNA结构 第三节 DNA的复制 1、定义：由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。 2、实验证据（1958 Meselson 和Stahl ）： 3、DNA半保留复制的生物学意义： DNA的半保留复制表明DNA在代谢上的稳定性，保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代。 二、与DNA复制有关的物质 1、原料：四种脱氧核苷三磷酸（dATP、dGTP、 dCTP、dTTP) 2、模板：以DNA的两条链为模板链，合成子代DNA 3、RNA引物：DNA的合成需要一段RNA链作为引物 4、引物合成酶（引发酶）：此酶以DNA为模板合成一段RNA,这段RNA作为合成DNA的引物（Primer)。实质是以DNA为模板的RNA聚合酶。 5、 DNA聚合酶:以DNA为模板的DNA合成酶 (1)都以dNTP为底物。 (2)都需要Mg2+激活。 (3)聚合时必须有模板链和具有3’-OH末端的引物链。 (4)链的延伸都方向为5→3。 6、DNA连接酶（1967年发现）：若双链DNA中一条链有切口，一端是3’-OH，另一端是5‘-磷酸基，连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接。 但是它不能将两条游离的DNA单链连接起来 DNA连接酶在DNA复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用 7、DNA 拓扑异构酶(DNA Topisomerase)： 主要功能是消除DNA解链过程中所 产生的扭曲力。 8、DNA 解链酶（DNA helicase) 通过水解ATP获得能量来解开双链DNA。 E.coli中的rep蛋白就是解链酶，还有解链酶I、II、III。 9、单链结合蛋白(SSB蛋白)：稳定已被解开的DNA单链，阻止复性和保护单链不被核酸酶降解。 三、DNA的复制过程（大肠杆菌为例） 双链的解开 RNA引物的合成 DNA链的延伸 切除RNA引物，填补缺口，连接相邻的DNA片段 复制起点固定 1 原核一个复制子, 真核多个复制子 2. 一个复制子, (一般)两个复制叉; 3.前导链, 滞后链相对 4.在一个复制周期中, 真核为一次; 原核可同时进行多次复制, 形成多个复制叉 双链解开、复制起始 DNA的半不连续复制（semi-discontinuous replication) DNA复制时其中一条子链的合成是连续的，而另一条子链的合成是不连续的，故称半不连续复制。 在DNA复制过程中，前导链能连续合成，而滞后链只能是断续的合成5??3 ?的多个短片段，这些不连续的小片段称为冈崎片段。 大肠杆菌 1 双链环状DNA 2. DNA复制形式为θ型 3. 定点(ori) 开始双向等速复制 4. 两个复制叉在距起始点1800处会合(Ter-Tus复合物阻止复制叉的移动)。 5. 只有一个复制单元，但可有多个复制叉。 双链环状、θ型复制、双向等速 四、复制的几种主要方式 1.线性DNA双链的复制 ①单一起点的单向复制。 (如腺病毒) 2 环状DNA双链的复制 ①θ型复制（如大肠杆菌）---单一起点的双向等速复制 滚环型： 单向复制的特殊方式 如：ΦΧ17