丹参素对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用和作用机制的研究-外科学(泌尿外科)专业论文.docx

解放军医学院硕士学位论文 解放军医学院硕士学位论文 万方数据 万方数据 MPO Myeloperoxidase 髓过氧化物酶 SOD Superoxide dismutase 超氧化物歧化酶 MDA Malondialdehyde 丙二醛 RT-PCR Real Time PCR 实时定量 PCR HE Hematoxylin．Eosin 苏木素—伊红 SCre Serum creatinine 血肌酐 BUN IL-1 Blood urea nitrogen Interleukin-1 血尿素氮 白介素 1 IL-6 TNF-α ICAM—1 Interleukin-6 Tumor Necrosis Factor-α Intercellular adhesion molecule-1 白介素 6 肿瘤坏死因子 α 细胞间黏附分子-1 TBA Thiobarbituric acid 硫代巴比妥酸 DGF ROS Delayed graft function Reactive oxygen species 移植肾功能延迟恢复 活性氧 LPO Lipid peroxide 过氧化脂质 作者：王雷雨 学科专业：外科学（泌尿外科） 导师：蔡明 丹参素对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用和作用机制的研究 中文摘要 第一部分：建立肾脏缺血再灌注损伤小鼠模型 目的：成功建立肾脏缺血再灌注损伤小鼠模型，为后续实验提供支持。 方法：BALB／c小鼠，6-8周龄，20-25g，雄性，30只，随机选择24只作为肾缺血 再灌注损伤模型组，术后观察生存率，测血肌酐，切取肾脏进行HE染色；其余6只 作为对照组只开腹、分离肾蒂，切除右侧肾脏，不做其他任何处理，术后测血肌 酐，切取肾脏进行HE染色。 结果：模型组术后生存率达 91.67%，与对照组比较肌酐的值明显升高，肾脏出现 典型病理损伤。 结论：小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型建立成功，术后生存率较高，肾功能明显受 损，肾脏出现典型病理损伤，符合实验要求。 第二部分：在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中丹参素作用的研究 目的: 明确丹参素在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用。 方法：BALB／c小鼠，6-8周龄，20-25g，雄性，20只，随机分为sham组、IRI组、 IRI-15mg组、IRI-30mg组、IRI-60mg组. IRI组、IRI-15mg组、IRI-30mg组、IRI-60mg 组根据第一部分手术方式建立缺血再灌注损伤模型，其中IRI-15mg组、IRI-30mg 组、IRI-60mg组使用不同剂量丹参素进行干预，术后采集血清和肾脏等标本，肾 组织标本通过HE染色观察肾脏组织形态学变化；检测血清标本肌酐、尿素氮的值。 结果： IRI-30mg 组（113.95+2.91、48.44+1.81）、IRI-60mg 组（86.12+3.13、 40.63+3.49）的肌酐、尿素氮水平均低于 IRI 组（169.54+5.15、71.48+4.92）， 结果有统计学意义（P0.001、P0.001；P0.001、P0.001）；IRI-15mg 组、IRI-30mg 组、IRI-60mg 组之间进行比较，差异均有统计学意义（P0.001、P0.01；P0.001、 1 P0.01）；IRI-15mg 组、IRI-30mg 组、IRI-60mg 组的病理损伤程度依次减轻。 结论：丹参素能够减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤。 第三部分：在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中丹参素作用机制的研究 目的：阐明在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中丹参素的作用机制。 方法：通过 RT-PCR 检测 IL-1β、IL-6、TNF-α的表达；通过化学比色法检测髓 过氧化物酶水平；通过考马斯亮兰法检测肾组织标本蛋白浓度；通过黄嘌呤氧化 酶法检测抗氧化酶——超氧化物歧化酶的水平；通过 TBA 法检测丙二醛含量。 结果： IRI组的MPO活力（17.39+0.58）、IL-1β(2.35+ 0.06)、IL-6(2.38+ 0.06)、 TNF-α(2.53+ 0.041)等代表炎症水平的指标明显高于sham组(11.44+0.54、0.97+ 0.08、1.03+ 0.05、0.99+ 0.06)，差异均有统计学意义（P0.05、P0.001、P0.001、 P0.001）；IRI组的SOD活力（120.57+2.94）显著低于sham组（156.08+9.06），而 IRI组的MDA含量（17.29+0.65）显著高于sham组（11.11+0.71），差异均有统计学 意义（P0.05、 P0.001、P0.001、P0.001）.丹参素处理的IRI-60mg组 （13.53+0.94）、IRI-30mg组（14.98+0.69）分别与IRI组（17.39+0