番茄Sl-XRN2、Sl-XRN4基因的克隆及遗传转化研究-生物学专业论文.docxVIP

重庆大学硕士学位论文英文摘要 重庆大学硕士学位论文 英文摘要 PAGE PAGE IV sequencing. ⑦ Agrobacterium-mediate transformation of vectors was made in tomato and being screened from Hyg 100mg/L pressure. Keywords: tomato，Sl-XRN2 gene，Sl-XRN4 gene，expression analysis，genetic transformation 重庆大学硕士学位论文目录 重庆大学硕士学位论文 目 录 目 录 中文摘要I 英文摘要 II 缩略词表 VII 1 绪 论 1 TOC \o 1-2 \h \z \u HYPERLINK \l _TOC_250005 1.1 XRN 蛋白家族概述 1 HYPERLINK \l _TOC_250004 1.2 XRN 家族主要功能 2 HYPERLINK \l _TOC_250003 XRN 家族参与 rRNA 加工过程 2 HYPERLINK \l _TOC_250002 XRN 家族参与 miRNA 途径 4 HYPERLINK \l _TOC_250001 XRN 家族是 PTGS 的抑制子 6 HYPERLINK \l _TOC_250000 1.2.4 XRN4 参与乙烯信号转导通路 7 1.3 研究目的和意义 9 1.4 研究内容和技术路线 10 1.4.1 研究内容 10 1.4.2 技术路线 11 2 番茄 Sl-XRN2、Sl-XRN4 基因的克隆及鉴定 12 2.1 材料与仪器 12 2.1.1 主要实验材料 12 2.1.2 主要试剂 12 2.1.3 引物 12 2.1.4 常用抗生素贮存溶液 12 2.1.5 培养基与缓冲液 13 2.1.6 实验仪器 14 2.2 实验方法 15 2.2.1 番茄各组织总 RNA 的提取 15 Sl-XRN2 基因的克隆 15 Sl-XRN4 基因的克隆 16 2.2.4 目的 DNA 片段的回收 16 2.2.5 生物信息学分析 16 2.2.6 Sl-XRN2 的表达模式分析 16 2.2.7 Sl-XRN2 在伤害胁迫下的表达模式分析 17 2.2.8 Sl-XRN4 的表达模式分析 17 2.3 结果与分析 17 2.3.1 Sl-XRN2 基因的克隆 17 2.3.2 Sl-XRN2 基因的生物信息学分析 18 2.3.3 Sl-XRN4 基因的克隆 20 2.3.4 Sl-XRN4 基因的生物信息学分析 21 2.3.5 Sl-XRN2 基因的表达模式分析 22 2.3.6 Sl-XRN2 基因在伤害胁迫下的表达模式分析 23 2.3.5 Sl-XRN4 基因的表达模式分析 23 3 番茄 Sl-XRN2、Sl-XRN4 基因表达载体的构建及遗传转化研究 25 3.1 材料与仪器 25 3.1.1 主要实验材料 25 3.1.2 主要试剂 25 3.1.3 引物 25 3.1.4 常用抗生素和激素贮存溶液 26 3.1.5 培养基与缓冲液 26 3.1.6 实验仪器 27 3.2 实验方法 27 3.2.1 Sl-XRN2、Sl-XRN4 基因正义、反义表达载体构建 27 3.2.2 大肠杆菌转化 30 3.2.3 农杆菌转化 31 3.2.4 Sl-XRN2、Sl-XRN4 基因转化番茄研究 31 3.3 结果与分析 33 3.3.1 Sl-XRN2 基因正义、反义载体构建 33 3.3.2 Sl-XRN4 基因正义、反义载体构建 35 3.3.3 Sl-XRN2、Sl-XRN2 基因转化番茄研究 38 4 讨 论 39 4.1 Sl-XRN2、Sl-XRN4 基因的克隆及分析 39 4.2 载体的构建策略 40 4.3 Sl-XRN2、Sl-XRN4 基因转化番茄的研究 40 5 结论与展望 41 5.1 结论 41 5.2 后续工作展望 41 致 谢 43 参考文献 44 附 录 49 A 作者在攻读学位期间发表的论文目录 49 B 作者在攻读学位期间参与的科研项目 49 重庆大学硕士学位论文缩略词表 重庆大学硕士学位论文 缩略词表 VII VII 缩略词表 缩 略 英文名称 中文名称 AGO Amp ARGONAUTE proteins Ampicillin AGO 蛋白 氨苄青霉素 AS Acetosyringone 乙酰丁香酮 Aug Augmentin 阿莫西林钠克拉维酸钾 bp Base pair 碱基对 CaMV Cau