细辛脂素联合受体脾细胞诱导心脏移植免疫耐受的研究.docVIP

细辛脂素联合受体脾细胞诱导心脏移植免疫耐受的研宄 】目的：本实验通过术前7日和术前3 曰输注不同剂量供者脾细胞于受体胸腺内，联合中药 细辛中的细辛脂素成分，探讨其对心脏移植免疫耐受 的诱导，并对诱导效果加以比较。方法：提取中药细 辛中的细辛脂素成分。健康雄性Wistar大鼠（供体） 和SD大鼠（受体）各80只随机配对，建立大鼠腹部 异位心脏移植模型，将接受心脏移植的SD大鼠分成5 组：A组：阳性对照组，行腹部异位心脏移植，不给 任何处置；B组：细辛脂素组：行腹部异位心脏移植， 术前7天开始灌服细辛脂素25 mg?kg-l?d-l; C组：脾 细胞诱导组1，术前7天开始输注供者脾细胞于受体 胸腺内；D组：脾细胞诱导组2，术前7天开始输注 供者脾细胞于受体胸腺内，术前7天开始灌服细辛脂 素25 mg?kg-l?d-l; E组：脾细胞诱导组3,术前3天 开始输注供者脾细胞于受体胸腺内，术前7天开始灌 服细辛脂素25 mg?kg-l?d-l。每组各8只术后第7天 处死。另外8只用于观察移植物生存天数。噻哇蓝 （MTT）法检测供受体混合淋巴细胞反应；应用ELISA 法检测受体血清中IL-2、IFN- y、IL-4和IL-10水平；结 果：1、免疫诱导组联合细辛脂素组(D组和F组)移 植心存活时间较阳性对照组显著延长(P 关键词】细辛脂素;心脏移植;脾细胞;细胞因子; 免疫耐受 】R965 】A 文章 编号】1008-6455 (2011) 12-0019-02 The Induction of Immune Tolerance in Rats Cardiac Allograft by Asarinin Combined with splenocyte Zhang Lili Wang Xiaoyun Chen Yanjunl et al. [AbstractlObjective: To study the effect of immune tolerance in rats cardiac allograft induced by donor splenocyte 7 days and lday before operation combined with Asarinin. Methods: To extract the asarinin from herba asari. The 80 SD rats (receptor) and 64 wistar rats (donor) were divided into five groups: group A (control group) ; group B (Asarinin treated 7 days before operation) ; group C (splenocyte treated 7 days before operation) ; group D (splenocyte treated 7 days before operation and Asarinin) ; group E (splenocyte treated 3 days before operation and Asarinin) .Some were to examine survival time (n 8) and others were to observe mixed lymphocyte reaction (MLR) between the donor and receptor with MTT; the level of IL-2,IFN- y JL-4 and IL-10 in serum with ELISA postoperatively 7 days (n 8) . Result: 1.Allografts survival time is prolonged in group D and E (P Hl3 :取产自黑龙江的 中药材辽细辛，购自黑龙江省中药联营公司，鉴定师 黑龙江省中医药大学王栋教授。采用常用的方法提取 中药细辛中的细辛脂素成分，经鉴定细辛脂素纯度达 95%以上，将提取的细辛脂素与橄榄油以 500mg/100ml比例配成悬浊液。 1.2大鼠腹部异位心脏移动物模型和免疫耐受诱 导模型制备 1.2.1实验动物:受体大鼠健康雄性SD系大鼠， 体重200 — 250g，供体大鼠健康雄性Wistar系大鼠， 体重150 — 200g。由哈尔滨医科大学附属第二医院实 验动物中心提供。 采用大鼠的同种异体腹部异位心脏移植术。供、 受体均为无菌手术。供心的主动脉和肺动脉分别与受 体的腹主动脉和下腔静行端個I］吻合。 1.2.2主要试剂和试剂盒:高钾停跳液：哈医大二 院