核酸的结构与功能培训.pptVIP

内容纲要 一、核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架 一、核苷酸的组成磷酸、戊糖和碱基 核酸中的部分稀有碱基 碱基的紫外吸收性质 体内重要的游离核苷酸及其衍生物 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 二、核苷酸的连接方式 一、DNA的一级结构 （二）DNA二级结构的多样性 三、DNA的高级结构 （二）真核生物细胞中DNA的组装 四、线粒体DNA 第三节 RNA的结构与功能 RNA与DNA的比较 一、信使RNA 真核生物mRNA的结构特征 ①5-端有一个特殊结构：7mG-5ppp5-Nm-3-P，称为帽子结构。 ②3-端有一段长约20~250个核苷酸的多聚腺苷酸（poly A），称为多聚A尾巴（poly A tail） ③mRNA分子上的每三个核苷酸为一组，构成遗传密码（genetic code），可以决定多肽链上某一个氨基酸，又称为三联体密码（triplet code）。 ④寿命最短。 二、tRNA 三、核糖体RNA 表1-5 原核及真核生物核糖体的组成 rRNA的结构特征 第四节 核酸的理化性质 一、核酸的一般性质 核酸溶液的黏度比较大 ，核酸粘度降低或消失，即意味着变性或降解。 DNA分子的长度与直径之比达到107，极易在机械力的作用下发生断裂。 核酸的沉降特性 。 二、核酸的紫外吸收 三、核酸的变性与复性 （一）变性（denaturation） 核酸的变性是指核酸的互补配对碱基之间的氢键断裂，而构成磷酸-戊糖骨架的3,5-磷酸二酯键并未发生变化。 温度升高，溶液的盐浓度降低，或者溶液的酸碱度改变，都可以使核酸发生变性。实验室中最常用的使DNA分子变性的方法之一是加热。 （二）复性与杂交 变性DNA在适当条件下，两条互补的单链重新缔合，恢复天然的双螺旋结构，这个过程称为复性（renaturation） 将不同来源的DNA分子放在同一溶液里，经热变性后缓慢冷却，使其复性。若这些变性的DNA单链之间在某些区域有碱基互补的序列，则复性时，它们之间会形成双链，该过程称为核酸分子杂交（hybridization） 热变性 解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260（absorbance，A，A260代表溶液在260nm处的吸光率）值作图，所得的曲线称为解链曲线。 第五节 核酸的催化性质 一、核酶 二、脱氧核酶 核酶与脱氧核酶的研究意义 对研究生命起源和进化具有重大意义 拓展了酶学的研究范围 科研以及医疗应用 第六节 基因组学与人类基因组计划 人类基因组计划的出现 癌症研究的转折点——人类基因组的全序列分析 Renato Dulbecco， Science 1986 人类基因组计划的步伐 下一阶段：后基因组研究 * tRNA的三级结构 —— 倒L形 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 核糖体RNA（rRNA）是细胞内含量最多的RNA，约占RNA总量的75 % ~80%。rRNA与蛋白质共同构成核糖体或称为核蛋白体（ribosome），是细胞内蛋白质生物合成的场所。原核生物与真核生物的核糖体均由大亚基和小亚基构成。 33种 49种 18S rRNA 5.8S rRNA 5S rRNA 28S rRNA 小亚基(40S) 大亚基(60S) 真核生物(80S) 21种 31种 16S rRNA 5S rRNA 23S rRNA 小亚基(30S) 大亚基(50S) 原核生物(70S) 蛋白质 rRNA 亚单位 核糖体 rRNA分子内部局部碱基互补，形成许多“茎－环”结构，为核糖体蛋白的结合与组装提供了结构基础。 * rRNA的种类（根据沉降系数） 真核生物 5S rRNA 28S rRNA 5.8S rRNA 18S rRNA 原核生物 5S rRNA 23S rRNA 16S rRNA 核蛋白体的组成 占总重量的35% 49种 占总重量的30% 31种 蛋白质 4718个核苷酸 160个核苷酸 120个核苷酸 28S