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生物化学课件第章 核酸化学
生 物 化 学Biochemistry 第三周 第二讲 2010.9.30 蛋白质章节测验1 班级、学号、姓名 问题一: 如何通过样品中的含氮量(N%)来大致地推测样品中粗蛋白的含量(Pro%)? 解释这样推测的依据是什么? 问题二: 维持蛋白质一、二、三级结构的主要作用力分别有那些? 问题三: 凝胶过滤分离蛋白质的依据和原理? 通过本章的学习应该明确以下几个问题: 第一节 概述 一、核酸的发现与发展 第二节 核酸的组成 一、磷酸(phosphate) OH HO-P=O OH 四、核苷(nucleoside) 核苷是核糖与碱基(嘌呤碱或嘧啶碱)结合物。 嘌呤核苷是嘌呤的第9位N与核糖或脱氧核糖第1′位碳连接; 嘧啶核苷是嘧啶的的第1位N与核糖或脱氧核糖第1′位碳连接; 八种核苷酸如下表所示 M-单(D-二、T-三);P-磷酸 RNA的名称为某苷(一磷)酸,DNA在某前加脱氧两字。 例如:AMP称腺苷一磷酸(或腺苷酸), dAMP称为脱氧腺苷一磷酸(脱氧腺苷酸)。 稀有核苷酸与上类似; 六、稀有组分(Minor components) 稀有组分是稀有碱基和稀有核苷的总称。 1、稀有碱基(Minor bases)∶ 次黄嘌呤(I)、黄嘌呤(X)、5-甲基胞嘧啶(m5C)、二氢尿嘧啶(Dhu )、 5-羟甲基胞嘧啶(hm5C) 2、稀有核苷(Minor nucleoside) 假尿嘧啶核苷(Ψ)、次黄嘌呤核苷、二氢尿嘧啶核苷。 第三节 核酸的结构 一、核酸的一级结构 核酸的一级结构是指核苷酸的组成及排列顺序(即碱基序列)。 DNA、RNA都是由许多核苷酸通过3′、5′磷酸二酯键将前一个核苷酸与后一个核苷酸连接起来,形成无分支的多核苷酸链。 在链的一端的一个戊糖的3′位上OH是游离存在的,另一端的戊糖其5位上连有一个磷酸基团呈单磷酸酯状态,这两个末端分别称为3′末端及5′末端。 DNA一级结构的简写形式 核苷酸顺序又称碱基顺序,是蛋白质与RNA结构的生物语言。 DNA 与RNA的区别 DNA双螺旋结构模型的要点∶ (1) DNA分子是由两条反平行的多聚脱氧核苷酸链,绕同一中心轴盘旋形成的右手螺旋结构; (2) 每条主链由脱氧核糖与磷酸通过3′、5′磷酸二酯键连接而成,并位于螺旋外侧。碱基位于螺旋内侧,碱基平面与螺旋中心轴垂直。螺旋表面有两条螺旋形的凹槽∶大沟和小沟。 (3) 两链间的碱基以氢键互相配对。A与T配有两个氢键,G与C配有三个氢键。 DNA分子所含嘌呤碱基的总数等于嘧啶碱基的总数(即A+G=T+C)---碱基当量定律。 (4)维持双螺旋稳定的因素:横向为氢键,纵向为碱基间的堆积力。 DNA碱基组成的Chargaff规则 (1)腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相等,即A=T (2)鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔数也相等,即G=C (3)含氨基的碱基(腺嘌呤和胞嘧啶)总数等于含酮基的碱基(鸟嘌呤和胸腺嘧啶)总数,即A+C=G+T (4)嘌呤的总数等于嘧啶的总数,即A+G=C+T DNA的三级结构 DNA的三级结构是指双螺旋DNA的扭曲或再螺旋。 生 物 化 学Biochemistry 第四周 第二讲 2010.10.9 三、RNA的结构 RNA(核糖核酸)∶ 主要分布在细胞质中,与蛋白质合成密切相关 Ribosomal RNAs (rRNA,核糖体RNA)占80%以上:与蛋白质构成核糖体,是合成蛋白质的场所 Messenger RNAs (mRNA,信使RNA) 占5%:合成蛋白质的模板 Transfer RNAs (tRNA ,转运RNA)占15%:在蛋白质合成中运输氨基酸 * tRNA的一级结构特点 含稀有碱基较多 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 由70-90个核苷酸组成 第四节 核酸及核苷酸的性质 一、一般理化性质∶ 核酸为多元酸,具有较强的酸性; DNA是线性高分子,粘度极大 均为极性化合物,难溶于有机溶剂。 嘌呤碱和嘧啶碱均含有共轭双键,因此,核苷、核苷酸、DNA和RNA在240~290nm范围内均有紫外吸收。 最大吸收峰在260nm左右。 核酸的紫外吸收性质可以用于鉴定DNA和RNA的纯度,常用A260/A280比值来判断。 纯DNA ∶A260/A280=1.8 纯RNA∶A260/A280=2.0 若样品的蛋白质含量增加,A260/A280比值怎样变化? 增色效应(hyperchromic effect)∶当核酸变性或降解时,
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