医学免疫学教学件汇编-17免疫诊断与免疫治疗-ww.ppt

XSCID的IL-2受体?链基因治疗 性联SCID的发病是由于IL-2R?基因缺陷 2000年法国科学家在Science首次报道2例成功基因治疗的结果；至2002年法、英、美共治疗14例，12例成功。 第一例成功接受IL-2R?基因治疗的男孩Rhys Evans XSCID 基因治疗原理 基因治疗的主要问题 病毒载体的安全性 靶基因选择 基因导入效率 基因的可调控表达 （二）、 免疫细胞治疗 细胞疫苗： 肿瘤细胞疫苗：灭活瘤苗、异构瘤苗。自体或同种肿瘤细胞经理化方法处理，抑制其生长保留其免疫原性。 基因修饰的瘤苗：用基因修饰的方法改变肿瘤细胞的遗传性状，降低致瘤性，增强免疫原性 树突状细胞疫苗：使用肿瘤提取物抗原或肿瘤抗原多肽等体外刺激树突状细胞，或用携带肿瘤相关抗原基因的病毒载体转染树突状细胞，再回输给患者，可有效的激活抗肿瘤免疫应答 取自体淋巴细胞经体外激活、增殖后回输患者，直接杀伤肿瘤或激发机体抗肿瘤免疫效应，即过继免疫（Adoptive immunity） CIK（cytokine induced killer）:外周淋巴细胞经 PHA+IL-2+IL-1等多种细胞因子诱导培养 TIL（tumor infiltrating lymphocyte）：肿瘤中 T 细胞经体外 IL-2 诱导培养 过继转移： 移植所用干细胞来自于 HLA 型别相同的供者，采集CD34+ 干细胞 1. 骨髓 2. 外周血 3. 脐血 造血干细胞移植： 免疫细胞治疗的主要问题 疗效不稳定，不同个体反应不同 只能采取个体化治疗，不能工业生产，质量控制有难度 成本高，价格昂贵 种 类 举 例 主 要 作 用 细菌产物 卡介苗、短小棒状杆菌、胞壁酰二肽、二霉菌酸酯海藻糖 活化巨噬细胞、NK细胞 合成性分子 吡喃共聚物、马来酐二乙烯醚（MEV）、嘧啶、聚肌胞苷酸 诱导产生IFN 细胞因子 IFN-α、IFN-β、IFN-?、IL-2 活化巨噬细胞、NK细胞 激 素 胸腺素、胸腺生成素 增强胸腺功能 （三）、生物应答调节剂和免疫抑制剂 天然动植物药物 免疫增强剂： 黄芪、茯苓、枸杞等 生物应答调节剂：具有促进或调节免疫功能的制剂，通常对免疫功能正常者无影响，而对免疫功能异常，特别是免疫功能低下者有促进或调节作用 免疫抑制剂 化学合成药物 糖皮质激素、环磷酰胺、硫唑嘌呤 2. 微生物制剂 环孢素A（CsA)、FK506、麦考酚酸酯、雷帕霉素 3. 来源于动植物的免疫抑制剂 苦参、雷公藤等 常用于防止移植排斥反应的发生和自身免疫病的治疗 （二）、免疫细胞功能测定： T细胞功能测定 B细胞功能测定 吞噬细胞功能测定 T细胞功能测定： T细胞增殖试验 细胞毒试验 细胞因子检测 皮肤试验 3H-TdR 掺入法： 氚标记的胸腺嘧啶核苷，掺入新合成的DNA中，增殖越多3H-TdR掺入越多 2. MTT法 3-（4，5-二甲基-2-噻唑）-2， 5-二苯基溴化四唑，被琥珀酸脱氢酶还原为紫褐色颗粒 细胞增殖的检测法： 细胞毒实验： 细胞形态：台盼蓝染色 51Cr的释放 LDH释放 凋亡细胞检测法： 细胞形态： 琼脂糖电泳: DNA ladder band FACS:DNA 断裂为非二倍体 TUNEL：TdT-dUTP 连接着色 DNA 3’断裂末端 死细胞 细胞因子的检测 生物活性检测法：CTLL 细胞株—— IL-2 依赖 增殖 vs 细胞因子含量 免疫学检测：ELISA ELISPOT B细胞功能测定 Ig定量：单向琼脂扩散、免疫比浊法、ELISA B细胞增殖试验 抗体形成细胞测定：溶血空斑实验 吞噬细胞功能测定 趋化功能测定（Boyden 小室） 吞噬功能测定 硝基蓝四氮唑 NBT—淡黄色经超氧阴离子O2-变为蓝黑色颗粒 荧光标记的生物颗粒、天然有色颗粒（鸡红细胞） 三、免疫学检测方法的应用 疾病的诊断： 感染性疾病 超敏反应性疾病 自身免疫病 免疫缺陷病 肿瘤 免疫学监测：  免疫学防治Immunoprophylaxis and immunotherapy 一、免疫预防 疫苗的基本要求: 安全 有效 实用 自然免疫：机体感染病原体后建立的特异性免疫，包括胎儿或新生儿经胎盘或乳汁从母体获得抗体。 疫苗（vaccine）：一些能够诱导