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氟伐他汀与罗格列酮对冠心病患者单核细胞ABCA1表达的影响-心血管内科学专业论文
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氟伐他汀与罗格列酮对冠心病患者单核细胞 ABCA1 表达的影响
硕士研究生 李华波
导 师 全智华 教授
中 文 摘 要
目的 以冠心病患者外周血单核细胞为研究对象,观察氟伐他汀与罗格列酮单独及 联合应用对体外培养的单核细胞三磷酸腺苷结合盒转运体 A1(ABCA1)表达的影响, 探讨二者联合应用对防治动脉粥样硬化的意义。
方法 随机选择冠心病患者,于冠脉造影时无菌采集血液标本,肝素抗凝,密度梯 度离心法分离患者外周血单核细胞,分别与氟伐他汀及罗格列酮单独或联合作用,于 细胞培养箱孵育。孵育结束后,收集各组细胞,采用 TRIzol 试剂 RNA 提取法分别提 取各组细胞总 RNA,逆转录多聚酶链反应分别检测各组细胞 ABCA1、PPARγ 及 LXRα mRNA 的表达,Western 印迹法检测 ABCA1 蛋白的表达。根据各组细胞 ABCA1 表达的差异,分析氟伐他汀及罗格列酮对单核细胞 ABCA1 表达的影响。
结果 1.与对照组比较,单核细胞与罗格列酮作用后,ABCA1 mRNA 和蛋白的表达 呈时间依赖性和浓度依赖性增加(P 0.05),PPARγ 及 LXRα mRNA 表达亦上调(P
0.05)。
2.氟伐他汀作用于单核细胞不能增强单核细胞 ABCA1 mRNA 及蛋白的表达 (P 0.05)。
3.10.0μmol/L 氟伐他汀与 10.0μmol/L 罗格列酮联合作用于单核细胞 24h 后, PPARγ的表达明显增强(与对照组及罗格列酮组比较,P 0.05),LXRα mRNA 表 达增强(与对照组比较 P 0.05,与罗格列酮组比较差异无显著性 P 0.05),ABCA1 mRNA 与蛋白的表达均上调(与对照组比较 P 0.05,与罗格列酮组比较差异无显著 性 P 0.05)。
结论 1.罗格列酮能诱导单核细胞 PPARγ及 LXR 基因表达,进而促进 ABCA1 基因 的表达,可能通过 PPARγ-LXRα-ABCA1 途径升高 HDL 水平。
2. 氟伐他汀不能增强单核细胞 ABCA1 的表达,其升高 HDL 的机理与
ABCA1 基因表达无关。
3. 氟伐他汀与罗格列酮联合作用对升高 PPARγ基因表达有协同作用,对单 核细胞 ABCA1 的表达不产生拮抗效应,二者在临床上联合应用可能发挥更好的调脂、 抗动脉粥样硬化的作用。
关键词 单核细胞;逆转录多聚酶链反应;Western 印迹;三磷酸腺苷结合盒转运体
A1;动脉粥样硬化。
Effects of Fluvastatin and Rosiglitazone on the Expression of ABCA1 in Monocytes of Patients with Coronary Heart Disease in Vitro
ABSTRACT
Objective The study was designed to examine the effects of fluvastatin and rosiglitazone alone or combined therapy on the expression of ABCA1 mRNA and protein in monocytes of patients with coronary heart disease in vitro. To evaluate the effect of fluvastatin and rosiglitazone combined therapy on antiarteriosclerosis.
Methods Monocytes were isolated by density gradient method from blood of patients with coronary heart disease, then divided into different group. Different group monocytes incubated with 10.0μmol/L flivastatin or 10.0μmol/L rosiglitazone for 0h、6h 、12h、24h,
or incubated with flivastatin or rosiglitazone at different concentrations for 24h, or incubated with 10.0μmol/L flivastatin and 10.0μmol/L rosiglitazone for 24h, respectived.
Total RNA of monocytes were abstrac
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