富血小板血浆对骨缺损区非血管化结构性移植骨再血管化与骨改建实验研究-外科学专业论文.docx

PAGE PAGE 10 富血小板血浆对骨缺损区非血管化结构性移植骨再血管化与 骨改建实验研究 摘要 目的：通过建立动物骨缺损实验模型，观察不同频次使用富血小板血浆 （PRP）对骨缺损区非血管化结构性植骨血管化以及骨改建的影响。 方法：实验选取 45 只新西兰大白兔，6-8 月龄，体重 2.0-2.5kg，随机 分为 A、B、C 三组，每组 15 只。A 组为对照组，B 组为使用一次 PRP 组,C 组为多次使用 PRP 组。B、C 两组采用局麻下切开，用加有抗凝剂试管采 股静脉血 5ml，用二次离心法制作 PRP，并分别对全血和 PRP 中血小板 计数。PRP 使用前需要按 4:1 比例加入激活剂（含有 1ml10%氯化钙和 1000u 凝血酶）制成 PRP 凝胶。三组实验动物分别建立桡骨中上段 1cm 骨缺损模型，实验动物随机选择左侧或者右侧桡骨，连同骨膜一起切除 桡骨中上段 1cm，制造节段性骨缺损，并于同侧取自体髂骨植入缺损区。 A 组单植入自体髂骨，B 组植入加有激活剂的 PRP 和髂骨混合物，C 组植 入加有激活剂的 PRP 和髂骨混合物。并于术后 1、3、5 周，C 组于骨缺 损区注射 0.5ml 加有激活剂的 PRP,A、B 两组只注射等量的激活剂。分 别于术后 2、4、8 周时处死实验动物，各组随机处死 5 只，分别对标本 进行大体标本观察，X 线摄片，病理切片 HE 染色和免疫组化 CD34 染色 观察。对 X 线结果依据 Lane-Sandhu 骨移植 X 线评分标准评分，对病理 切片进行图像分析，测量新生骨面积百分比，CD34 染色计数微血管密度。 结果：全血中血小板平均浓度为 325.25×109/L，PRP 中平均血小板浓度 为 1308×109/L，PRP 中血小板计数是全血中血小板计数的 4.02 倍。术 后 2 周，三组大体标本观察无明显差异，X 线摄片未见明显骨痂生成， 骨移植 X 线评分为 0 分。B、C 组新骨形成、新生血管密度均高于 A 组 （PA-B=0.001，PA-C =0.001），C 组与 B 组新生骨百分比差异无统计学意 义（PB-C =0.089），C 组新生血管密度高于 B 组（PB-C =0.018）。术后 4 周 B、C 两组骨放射学评分高于 A 组（PA-B=0.047，PA-C 0.001）,C 组放 射学评分高于 B 组（PB-C =0.024）, B、C 两组新生骨痂百分比高于 A 组 （PA-B0.001，PA-C 0.001）,C 组新生骨痂百分比高于 B 组（PB-C =0.03）， B、C 两组新生血管密度高于 A 组（PA-B0.001，PA-C 0.001）,C 组新生 血管密度高于 B 组（PB-C =0.002）。术后 8 周，B、C 两组骨放射学评分 高于 A 组（PA-B=0.001，PA-C 0.001）,C 组放射学评分与 B 组差异无统计 学意义（PB-C =0.827），B、C 两组新生骨痂百分比高于 A 组（PA-B=0.001， PA-C 0.001）,C 组新生骨痂百分比高于 B 组（PB-C =0.035），B、C 两组 新生血管密度高于 A 组（PA-B0.001，PA-C 0.001）,C 组新生血管密度与 B 组差异无统计学意义（PB-C =0.82）。 结论 ：1.PRP 有促进兔桡骨骨缺损早期修复的作用。 2.多频次骨缺损区注射 PRP，有利于非血管化结构性植骨的再血 管化和骨改建。 关键词 ：富血小板血浆 兔桡骨骨缺损 血管化 An Experimental Study on Bone Defect Angiogenesis and Bone Repair of Non- vascularized Structural Bone Graft with Platelet- rich Plasma Abstract: Objective：Through the establishment of the animal bone defect experimental model, to study the effects of platelet-rich plasma(PRP) on bone defect angiogenesis of non-vascularized structural graft bone and bone healing. Methods：This experiment was conducted using 45 New Zealand white rabbits aged between 6 and 8 months and weighing between 2.0