粪肠球菌再感染根尖周炎与全身健康的相关性初探-口腔临床医学专业论文.docxVIP

福建医科大学硕士研究生毕业论文 福建医科大学硕士研究生毕业论文 粪肠球菌再感染根尖周炎与全身健康的相关性初探 PAGE PAGE 2 英文缩略词索引 英文缩写 英文全称 中文全称 ATCC America Type Culture Collection 美国标准菌种收藏所 IL-2 Interleukin-2 白介素-2 IL-6 Interleukin-6 白介素-6 CRP C-reactive protein C-反应蛋白 TH Helper T lymphocytes 辅助性 T 细胞 SD Sprague Dawley SD 大鼠 EDTA Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸 NaOCl Sodium Hypochlorite 次氯酸钠 PBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液 BHI Brain Heart Infusion 脑心浸液 D(630) Density(630) 密度(630) CFU Colony Forming Unit 菌落形成单位 SEM Scanning Electron Microscope 扫描电镜 ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附测定 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应 HE Hematoxylin eosin stained 苏木精伊红染色 粪肠球菌再感染根尖周炎与全身健康的相关性初探 中文摘要 近年来牙周炎对全身健康的影响已日益受到关注，人们逐渐认识到口腔疾病 可影响全身健康状态，遂提出了牙周医学概念。而临床中常被患者忽略的慢性根 尖周炎是否会影响全身健康目前尚无定论。有学者认为既然慢性根尖周炎和牙周 炎在发病过程和致病机制上有着众多相似性，因而推论慢性根尖周炎也可通过某 种机制，如引起菌血症或细胞因子入血等，从而影响全身健康。而相关的临床研 究发现，慢性根尖周炎确可影响外周血中细胞因子的水平，但是否会引起特定组 织器官的病变目前未见研究报道。 难治性根尖周炎是慢性根尖周炎中的特殊类型，其被定义为“经反复多次规 范根管治疗仍迁延不愈”，且粪肠球菌被认为是导致难治性根尖周炎的最主要病 原菌之一。同时肠球菌也是近年来医院感染的常见条件致病菌,可引起泌尿道、 手术伤口、血液感染等，在这些病症中，肠球菌可通过血液循环系统引起菌血症 及远隔器官的感染，或可通过影响外周血中细胞因子水平而影响全身健康。那么， 问题是，粪肠球菌作为难治性根尖周炎的病原菌时，是否也会引起菌血症，或远 隔器官的感染？ 考虑到难治性根尖周炎的致病菌较慢性根尖周炎较为单一和明确，同时其病 情也较慢性根尖周炎更为复杂和难以控制，在临床上危害更大，因此推测，如果 慢性根尖周炎会影响全身健康，那么难治性根尖周炎将对全身健康的影响更大。 另外一种可能，即使慢性根尖周炎作为一种局部炎症不会影响全身健康，那也不 能排除其特例，即粪肠球菌导致的难治性根尖周炎可能影响全身健康。 基于此，本课题组拟在前期构建的 SD 大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型基 础上，对比研究大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型和口腔常驻混合菌（不含粪肠 球菌）感染慢性根尖周炎模型对大鼠全身状况的影响，通过扫描电镜观察根尖生 物膜的形成及其形态，检测血液和部分脏器的相关指标（包括细菌培养、细胞因 子检测、组织病理检测），探索慢性根尖周炎，尤其是粪肠球菌再感染根尖周炎 与全身健康之间的相关性，并探讨其可能的病理生理机制。 第一部分 大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型根尖生物膜扫描电镜观察 方法：12 只大鼠建立 SD 大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型，采用扫描电镜分别 观察 SD 大鼠慢性根尖周炎组、消毒组、再感染组：导粪肠球菌 1 周及导粪肠球 菌 6 周根尖生物膜的形成及其细菌组成，每个时间点 3 只大鼠。结果：慢性根尖 周炎组仅在根尖孔附近观察到孤岛般局限性的细菌生物膜；消毒组未见明显的生 物膜，仅在根尖孔附近见少量球菌散在黏附；导粪肠球菌 1 周后在根尖孔附近， 可见成团聚集黏附面积较小的生物膜，较消毒组球菌数量明显增多；导粪肠球菌 6 周后，在距根尖孔 1 毫米范围内可见大量的球菌聚集黏附，形成连续的成片状 的成熟的生物膜。结论：大鼠慢性根尖周炎模型中细菌可定植于根尖外表面形成 根尖生物膜，粪肠球菌再感染根尖周炎可形成结构致密的成熟根尖生物膜。 第二部分 大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型血液和部分脏器（心、肝、脾）的 粪肠球菌检测 方法：15只大鼠建立SD大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型，分别在导粪肠球菌后 6小时、12小时、24小时、48小时、96小时各时间点随机处死3只大鼠并采集大鼠