当归对脑出血大鼠神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响-中西医结合临床专业论文.docx

2.2 脑出血的发病机制 ……………………… ………………………… 39 2.2 .1 脑 出血 对大 脑的 直接 病理损 害… …… …… …… …… …… …… …… …40 2.2 .2 脑 出血 对大 脑的 继发 性损伤 …… …… …… …… …… …… …… …… …40 2.3 脑出血的治疗进展 … … … …… … … … …………… …… …… … … … … 4 1 2.3 .1 脱 水降 颅脑 压， 减轻 脑水肿 …… …… …… …… …… …… …… …… …41 2.3 .2 控 制高 血压 …… …… ……… …… …… …… …… …… …… …… …… …41 2.3.3 促进脑细胞功能恢复 ……………………… ………………………… 4 1 2.3 .4 手 术治 疗… …… …… ……… …… …… …… …… …… …… …… …… …41 2.3 .5 康 复治 疗… …… …… ……… …… …… …… …… …… …… …… …… …42 3 展 望 ………………… … … … … … … … … … … … … … … … … … … …… 4 2 第 八 部分 参考 文献 … …… …… … …………… …… … …… …… … …… …… 4 3 第九部分 致 谢 …… … … … … … …… … … … … … …… … … … … ………… 4 5 第 十 部分 攻读 硕士 学 位期 间发 表 论文 … …… …… … …… …… … …… …… 4 6 当归对脑出血大鼠神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响 当归对脑出血大鼠神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响 PAGE PAGE 10 摘 要 目的：本实验通过建立大鼠尾状核脑出血模型，并给予不同剂量的当归水煎液干预， 观察不同剂量当归对神经细胞凋亡的影响及可能的相关机制。 方法：1.实验分组：将 60 只 Wistar 大鼠随机分为 6 组（每组 10 只）：空白组、假 手术组、 模型组、当归 低剂量 组(2.8g/kg) 、当归 中剂量 组(5.4g/kg)和 当归高 剂量组 (10.8g/kg)。2.脑出血大鼠模型建立及药物干预：采用Ⅳ型胶原酶/低分子肝素法注入大鼠 尾状核造模。空白组，不做任何处理；假手术组，仅开颅不注入药物；模型组，Ⅳ胶原 酶尾状核注射造模；假手术组与模型组造模后每天蒸馏水灌胃 1 次，每次 3mL；不同剂 量当归组（2.8g/kg、5.4g/kg 和 10.8g/kg）给予当归水煎液灌胃。3.神经功能障碍评分： 参照 Del-Bigio[34]神经行为学评分。4.标本检测：用反转录-聚合酶链反应法（RT-PCR） 检测 Bax mRNA、Bcl-2 mRN A 及 Caspase-3 mRNA 的表达水平；免疫组化法检测神经 细胞凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2 及 Caspase-3 表达水平。5.统计分析：采用 SPSS17.0 软件 对实验结果进行统计学分析，各组数据之间的差异比较采用单因素方差分析法，P＜0.05 表明实验结果具有统计学意义，所得结果以均数±标准差（?x±s）表示。 结果：1.免疫组化法结果显示：各分组经不同剂量当归水煎液处理后脑出血大鼠周 围脑组织内促凋亡相关蛋白 Bax 和 Caspase-3 呈现剂量依赖性的下降，具有显著性差异 （P0.05），而抑凋亡蛋白 Bcl-2 的表达呈现剂量依赖性的上升（P0.05）。2.RT-PCR 结 果显示：经不同剂量当归水煎液处理后脑出血大鼠脑组织内促凋亡相关蛋白 Bax mRNA 和 Caspase-3 mRNA 的表达呈现剂量依赖性的下降（P0.05），而抑凋亡蛋白 Bcl-2 mRNA 的表达呈现剂量依赖性的上升（P0.05）。 结论：大剂量当归对脑出血大鼠神经细胞的过度凋亡有调节作用，其中高、中剂量 当归作用更为明显，其发挥生物学效应的机制是通过提高脑出血大鼠血肿周围组织内抑 凋亡蛋白 Bcl-2 的表达，同时下调促凋亡蛋白 Bax 以及 Caspase-3 的表达而实现。 关键词：当归；脑出血；细胞凋亡；Bax；Bcl-2；Caspase-3 ABSTRACT Objective:This experiment aims to observe apoptosis change of nerve cells which treated with different dose of angelica sinensis on rat models. Methods:1.Group of Experiments：Rats were randomly divided into 6 groups(n=