副溶血性弧菌对含氯消毒剂的耐药响应及其耐药机理探究-食品科学与工程专业论文.docx

上海海洋大学硕士学位论文 上海海洋大学硕士学位论文 上海海洋大学硕士学位论文 上海海洋大学硕士学位论文 PAGE PAGE IV III III 其最小抑菌浓度值分别从 128ppm、128ppm、64ppm 上升到 256ppm、 256ppm 以及 128ppm。 2、原始、耐药菌株培养特性、菌落特征、生化特性比较研究 将原始、耐药菌株分别接种于胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）、硫代硫 酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂（TCBS）、双层科玛嘉以及科玛嘉培养基 中进行培养，观察其培养特性及菌落特征并对其进行生化鉴定分析。 结果表明，耐药菌株的培养特性和菌落特征与原始菌株并没有差异， 在 TSA、TCBS、双层科玛嘉以及科玛嘉培养基中均生长良好，并且都 呈现出副溶血性弧菌的典型菌落特征。然而，与原始菌株相比，耐药 菌株的生化特性却不尽相同，通过消毒剂的诱导，菌株在组氨酸同化、 氨基乙酸芳胺酶、磷酸酶、β-半乳糖苷酸酶、鸟氨酸脱羧酶、β-葡萄糖 苷酶、L-苹果酸盐同化、L-乳酸盐同化、赖氨酸脱羧酶、琥珀酸盐产 碱、乳酸盐产碱、Y-谷氨酰转移酶等方面发生了变化。 3、原始、耐药菌株生长特性比较研究 本实验比较研究了原始、耐药菌株在不同 NaCl 浓度（1%、2%、 3%、4%、5%、6%、7%、8%）以及不同 pH 值（pH5.5、pH6、pH6.5、 pH7、pH7.5、pH8、pH8.5、pH9）环境条件下的生长特性。研究表明， 对于盐度而言，耐药菌株和原始菌株的生长情况并无太大差异，除 NQ-250-T 和 NQ-246-Na 的最适盐度从原始菌株的 3%NaCl 变为 4%NaCl 之外，其它耐药菌株的最适盐度与所对应的原始菌株相同。在 相同 pH 下，耐药菌株与它们所对应的的原始菌株的生长情况发生了改 变，但其最适 pH 并未发生变化。 4、副溶血性弧菌对含氯消毒剂耐药机理探究 从超微结构、细胞形态、超氧化物歧化酶（SOD）活性和 DNA 分 型的生理角度探究了副溶血性弧菌对含氯消毒剂的耐药调控机制。结 果表明，与原始菌株相比，耐药菌株的细胞形态都表现出了体积由大 向小、形态由细长状向短粗状或椭圆状变化的趋势，并且经过含氯消 毒剂诱导后，副溶血性弧菌耐药菌株的的 SOD 活性均有所增加。但 20.5kb～1135kb 分子量 DNA 的脉冲场凝胶电泳（PFGE）图谱中并未 出现耐药菌株发生基因突变或超表达现象。 关键词：副溶血性弧菌，含氯消毒剂，耐药菌株，耐药性，耐药机理 Response of Vibrio parahaemolyticus to Chlorine-containing Disinfectants and Its Resistance Mechanisms ABSTRACT Disinfectant is an important agent to ensure food safety in food industry, especially chlorine-containing disinfectants, widely used in aquaculture farms and aquatic products processing factories because of broad spectrum, efficient, low toxicity and lowcost. Lots of evidence have showen that resistance of foodborne pathogens to disinfectants could bring serious hazard to humans and food industry. Vibrio parahaemolyticus(Vp.) is an important foodborne pathogen, frequently isolated from a variety of seafoods. This organism has been recognized as the leading cause of food poisoning in many countries of the world. However, the occurrence of resistance of Vibrio parahaemolyticus to disinfectants was not available by now. In our research, we studied the resistance response of this organism to clorine-containing disinfectants