低氧后处理体外干预缺氧缺血性脑损伤新生鼠的作用-儿科学专业论文.docx

中文摘要 中文摘要 广州医科大学硕士学位论文 广州医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 13 PAGE PAGE 10 低氧后处理体外干预缺氧缺血性脑损伤新生鼠的作用 硕士研究生：邓青青 导 师：常燕群 教授 学 科 专 业 ：儿科学 中文摘要 背 景 临床背景：新生儿缺氧缺血性脑损伤（Hypoxic-ischemic brain damage, HIBD） 是指各种围产期窒息引起的部分或完全缺氧、脑血流减少或暂停导致胎儿或新生 儿脑损伤。目前临床上主要治疗方法是对症支持治疗，尚缺乏有效疗法。 科研背景：相对于低氧预处理(Hypoxic preconditioning, HPreC)而言，低氧后 处理(Hypoxic postconditioning, HPostC)是指在机体损伤后给予适度的低氧干预， 诱 导 组 织 代 偿 性 修 复 。 其 主要 作 用 机 制 是 诱 导 低 氧 诱 导 因 子 1a (Hypoxia-inducible factor 1alpha，HIF-1a)的表达和促进神经干细胞增殖及抑制氧 自由基的生成等。HPostC 可部分替代一些实验显示有效治疗新生儿 HIBD 的方 法。 国内外最新研究：2003 年赵志青等首次研究 HPostC 体内干预心肌细胞的作 用，实验显示 HPostC 能修复损伤的心肌细胞，但因体内干预是有创性操作而较 难应用于临床。2008 年 Pignataro 等研究 HPostC 体外干预脑损伤成年鼠的作用， 实验显示 HPostC 能修复成年鼠脑损伤,目前少有报道 HPostC 体外干预 HIBD 新 生鼠的作用。 根据干预时间及周期不同，实验分二部分研究 HPostC 体外干预 HIBD 新生 鼠的作用。 第一部分实验：单次低氧后处理体外干预 HIBD 新生鼠的作用 目 的 研究单次低氧后处理 (Einmal hypoxic postconditioning; ，EHPC)体外干预 HIBD 新生鼠时 HIF-1a 表达和 HIBD 幼鼠学习记忆能力及情绪反应。 方 法 将 204 只 7 日龄 SD 新生鼠随机分成四组(每组 51 只),假手术组、HIBD 组、 15％02+85％N2 组及 8％02+92％N2 组。各组造模后放置缺氧舱中，分别充入 21%02、21%02、15%02、8%02 氧氮混合气体 1L/min，干预 5min，频率 1 次/天， 周期 1 天。每组再随机分 2 个亚组行免疫组化检测（n=6，海马齿状回 HIF-1a 表 达）和神经行为检测（n=45，跳台试验、旷场试验及高架十字迷宫试验各 15 只）。 结 果 1. 8％02+92％N2 组 HIF-1a 表达量最高且与其它三组差异有统计学意义 （P0.05），假手术组 HIF-1a 表达量最低（P0.05），而 HIBD 组与 15％02+85％ N2 组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。 2. 跳台试验示假手术组于学习潜伏期、记忆潜伏期、学习错误次数及记忆 错误次数中的均数最小且与其它三组差异有统计学意义（P0.05），其它三组之 间差异无统计意义（P＞0.05）。 3. 旷场试验示假手术组于周围区距离、中央区距离、总距离和进入中央区 次数中均数最小且与其它三组差异有统计学意义（P0.05），其它三组之间差异 无统计意义（P＞0.05）。 4. 高架十字迷宫试验示假手术组于闭臂距离、开放臂距离、总距离和进入 开放臂次数的均数最小且与与其它三组差异有统计学意义（P0.05），其它三组 差异无统计意义（P＞0.05）。 结 论 EHPC 体外干预能促进 HIBD 新生鼠海马齿状回 HIF-1a 表达, 但不能提高 HIBD 幼鼠学习记忆能力，也不能改善 HIBD 幼鼠情绪反应。 第二部分实验：间歇性低氧后处理体外干预 HIBD 新生鼠的作用 目 的 研究间歇性低氧后处理(Intermittent hypoxic postconditioning，IHPC)体外干预 HIBD 新生鼠时 HIF-1a 表达和 HIBD 幼鼠学习记忆能力及情绪反应。 方 法 动物模型制备、实验分组、样本量、检测指标及检验方法与第一部分实验相 同, 但各组干预时间为多日时程递增方式，即第一天低氧干预 5min，随后每天递 增 3min，频率 1 次/天，周期 7 天。 结 果 1. HIF-1a： 在四组之间两两比较，差异均有统计学意义（P0.05），8％ 02+92％N2 组 HIF-1a 均数最大，15％02+85％N2 组均数高于 HIBD 组，假手术组 均数最低。 2. 跳台试验：学习潜伏期和记忆潜伏期在四组中两两比较，差异有统计学 意义（P0.05），8％02+9