糖原的显示(PAS)应.pptVIP

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  • 2018-12-08 发布于福建
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糖原的显示(PAS)应

糖原的显示(PAS反应) 山东师范大学生命科学学院 邢维贤 实验目的 实验原理 实验用品 实验方法与步骤 实验结果 实验报告 目的要求 通过PAS反应,了解糖原显示的基本原理、方法以及糖原在细胞中的分布。 基本原理 糖原由D-葡萄糖的分支或直链组成,在肝和肌肉最丰富。过碘酸是一种强氧化剂,能将葡萄糖中乙二醇基(CHOH-CHOH)氧化成二个游离醛基(—CHO),游离醛基与Schiff ‘s试剂反应生成紫红色产物,颜色深浅与多糖含量成正比。 由于单糖在固定、脱水和包埋等组织化学操作过程中被抽提掉,故一般组织标本上所能显示的糖类主要是多糖,包括糖原、粘多糖、粘蛋白、糖蛋白和糖脂等。因此要确定此红色物质是否糖原还需要同时进行对照实验。糖原可被唾液淀粉酶水解,先用唾液淀粉酶作用再进行PAS显色,若反应为阴性,则表明是糖原,反之则为其他多糖。 实验用品 1.器材:石蜡切片机,盖玻片、载玻片、染色缸等. 2.试剂 0.5%过碘酸溶液;Schiff‘s试剂 3.材料:小鼠肝脏石蜡切片 切片经二甲苯和各级酒精复水后,入0.5%的过碘酸溶液中作用15分钟,取出后水洗。 注意:过碘酸的氧化是整个实验中最关键的步骤,过碘酸的作用时间与反应环境温度有关,当室温较高时,反应较快,过碘酸的作用时间应适当缩短,当室温

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